[发明专利]鱼精蛋白的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼精蛋白的制备方法，属于食品添加剂及其制备方法领域。

背景技术

鱼精蛋白是一种天然肽类，在食品中主要用作防腐剂。人们很早就知道了它的防腐特性，自1937年McClean报道了鱼精蛋白具有抑菌活性以来，Miller等于1942年，Negroni和Fisher等旧J于1944年研究发现鱼精蛋白具有阻止细菌生长的功能。从二十世纪八十年代后期开始，鱼精蛋白作为一种化学防腐剂的替代品出现在食品添加剂行列。如今，鱼精蛋白已经逐渐在食品工业中得到了广泛的应用，这是因为与一般的化学合成防腐剂相比，鱼精蛋白具有许多优点，如安全性高、防腐性能好、热稳定性好等。而且，作为精氨酸含量丰富的蛋白类物质，鱼精蛋白具有很高的营养性和功能性，如降血压、助呼吸、促进消化、抑制肿瘤、抗血栓、强化肝功能、抑制血液凝固等功能。另外，鱼精蛋白在医学领域也得到了广泛的应用，如延迟或阻止胰岛素的释放，或作为肝素的解毒剂等。

鱼精蛋白是一种多聚阳离子肽，主要存在于各类动物的成熟精巢组织中，与DNA紧密结合在一起，以所谓的核精蛋白的形式存在，它是一种小而简单的球形碱性蛋白质，其分子量小，通常在一万以下，一般由30个左右的氨基酸组成，其中2／3以上是精氨酸，加热不凝固。鱼精蛋白存在于雄性个体的精巢组织中，是在精子成熟过程中代替组氨酸的。鱼类精巢除作为养鱼饲料及一部分腌制食品利用外，其它用途很少，价值低。但如果从中分离出鱼精蛋白，并在适当的领域应用则可望提高其附加价值。

因此,研究一种工艺简单、可操作性强，适用于工业化生产以及得率高、纯度高的鱼精蛋白的制备方法具有明显的经济与社会效益。

发明内容

本发明旨在提供一种工艺简单、可操作性强，适用于工业化生产以及得率高、纯度高的鱼精蛋白的制备方法。

本发明所述的鱼精蛋白的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）取成熟精巢组织,洗静、均浆；

（2）加入硫酸酸解，得酸解液；

（3）向酸解液中加入硫酸铵去除杂蛋白质，过滤得滤液；

（4）再向滤液中加入硫酸铵盐析，过滤得沉淀物；

（5）将沉淀物加热水复溶静置，过滤得沉淀物，用乙醚洗涤，得洗涤物，凉干即得鱼精蛋白提取物。

优选的，本发明所述的步骤（2）中的硫酸为浓硫酸，用量为0.5mol/L，酸解时间为1-2h；

更优选的，本发明所述的步骤（3）中的硫酸铵用量为0.2mol/L，并调节溶液的PH值为3；

进一步优选的，本发明所述的步骤（4）中的硫酸铵用量为0.4mol/L，盐析时间为2-3h；

更进一步优选的，本发明所述的步骤（5）中的热水为85-95℃；

本发明所述的制备方法，产品得率为13.4%，产品质量高，抗菌效果好，并且具有工艺较简单，生产成本。

具体实施方式

实施例一：

取成熟精巢组织1000g,洗静、均浆得浆液1L，向浆液中加入浓硫酸0.5mol进行酸解1.5h，过滤得酸解液；再向酸解液中加入硫酸铵，用量为0.2mol/L，以去除杂蛋白质，过滤得滤液；再向滤液中加入硫酸铵盐析2.5h，用量为0.4mol/L，过滤得沉淀物；再将沉淀物加90℃热水复溶静置，过滤得沉淀物，再用乙醚洗涤，得洗涤物，最后凉干即得鱼精蛋白提取物134g。经测定，本发明所述的制备方法，产品得率为13.4%，产品质量高，抗菌效果好。

实施例二：鱼精蛋白的抗菌活性测定

经实验测定，本发明所制备的鱼精蛋白具有广谱抑制活性，能抑制枯草杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣形芽孢杆菌等的生长。对革兰氏阳性菌、酵母、霉菌也具有明显抑制效果。另外，鱼精蛋白能抑制好气性细菌胞子发芽后的发育，若与加热灭菌法并用，则效果更好。而且能有效地抑制肉毒梭状芽孢杆菌中的A型、B型及E型菌的发育。

对各种微生物来说，因菌种与性状差异，鱼精蛋白的最小抑制浓度(MIC)也不同。如霉菌、酵母，125ppm的鱼精蛋白浓度就可以达到抑制效果；枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌的MIC为500ppm；而大肠杆菌、沙门氏菌则为800ppm。但因食品原料种类，加工方法和加工环境的不同造成杀菌的所处环境差异，致使对各种菌种的最小抑制浓度有所改变。