[发明专利]一种单分散性空心金纳米球及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种增强拉曼材料制备的技术领域，更具体地，涉及一种单分散性空心金纳米球及其制备方法和应用。 

背景技术

在基于表面增强拉曼散射（SERS）检测的免疫分析研究及应用中，空心金属纳米常用作SERS标记的探针，构建高灵敏度、均一性和信号可重复性的夹心免疫分析。用于常见的肿瘤标志物的超灵敏检测，可以提供很多有用的诊断数据。先前制备的空心金属纳米球通常都是通过钴纳米球为核，并在其表面生长金壳层；然后再去除钴纳米核，得到空心的金属纳米球。然而，由于目前的钴纳米球制备技术还不能够实现单分散性钴纳米球的制备，所以这种方法不能获得均一性的空心金纳米球，这对后续的夹心免疫分析的定量分析有影响。 

在大多数发展中国家，恶心肿瘤（即癌症）是第二大死亡率最高的疾病，它影响了人体超过60个人体器官。目前已知的癌症有200多种，其中肺癌是死亡人数最多的，占全部癌症的1/4。为了癌症病人提高存活率和预后评估，早期的临床诊断室非常重要和必要的。但是肺癌早期的诊断遇到了许多挑战，因为肺癌早期一般是没有明显特异症状的，例如咳嗽，气短，消瘦。过去的几十个世纪，许多技术被开发并用于癌症检测，包括CT、NMR、胸部X光、PET-CT等等。但是它们也有很大的缺点：昂贵、费时、低灵敏度。 

生物标志物是细胞生理状态的指标并随着疾病的发生发展而改变。血清生物标志物在肿瘤早期诊断和评估治疗效果中都非常有用。传统用于抗原抗体检测的技术有RIA、FIA、ELISA、ECIA等等。他们之中荧光免疫分析由于其高灵敏度和低检测限度被广泛用于生物分析。但是，它的宽激发带限制了其运用。 

发明内容

发明目的：本发明的第一个目的是提供一种单分散性空心金属纳米球，作为SERS探针材料具有非常良好的均一性、灵敏度和可重复性的免疫分析特性。本发明的第二个目的是提供上述单分散性空心金属纳米球的制备方法。本发明的第三个目的是提供上述单分散性空心金属纳米球在制备SERS 探针中的应用。 

在本发明中，首先，以用单分散性无机或有机的纳米球为核，再在这核上沉积金属形成单分散性好的金属纳米壳，最后去除金属纳米壳的核即得空心金属纳米球。目前有机或无机的纳米球制备技术成熟，制备的纳米球单分散性好。本发明选择有机或无机的单分散性好的纳米球为核，制备单分散性好的金纳米壳，再进一步去除核即得到单分散性好的空心金纳米球。用这种单分散性良好的空心金纳米球制备而成的SERS 探针具有非常良好的均一性、灵敏度和可重复性的免疫分析特性。 

为了很好的解决第三个技术问题，我们发明了一种可行性很高的免疫分析用于快速可重复的检测肿瘤生物标志物如癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）等，该方法是基于SERS并用单克隆抗体修饰的空心金属纳米球，该空心金属纳米球是通过氢氟酸等腐蚀金属纳米壳的核而形成的，它表现了比金纳米壳更强的SERS活性是由于空心金属纳米结构表面的小孔结构。由于整个反应过程都是在液相中的，克服了在固相表面带来的扩散限制引起的反应慢问题。由于其表面热点引起局部电磁场增强，空心金属纳米球起到了很好的SERS增强效果。因此，它被用于构建SERS 探针并用于生物标志物的高灵敏免疫分析，先前制备的空心金纳米球通常都是通过钴纳米球为模板，并在其表面生长金壳层。然而，这种方法不能获得均一性的空心金属纳米球，对之后的定量分析有影响。这里，我们提出一种新的空心金属纳米球制备方法通过氢氟酸腐蚀单分散良好的单分散金纳米壳（GNSs）的二氧化硅核。用这种单分散性良好的空心金属纳米球制备而成的SERS探针具有非常良好的均一性、灵敏度和可重复性并用于免疫分析。CEA和AFP是一种最常见的肿瘤标志物之一，血清CEA和AFP也可以当成术前测试的有用预测数据，有研究表明肿瘤患者比健康人群的CEA和AFP水平高。 

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：一种单分散性空心金属纳米球，所述单分散性空心金属纳米球具有单分散性的空心内核和单分散性的金属纳米外层，所述金属纳米外层为金纳米层、银纳米层、铜纳米层或铂纳米层中的一种或几种，所述单分散性的空心内核是通过腐蚀单分散的有机或无机纳米球而成。 

其中，上述单分散性空心内核直径为40-800 纳米。 

其中，上述金属纳米外层厚度为20-500 纳米。 

上述的一种单分散性空心金属纳米球的制备方法，包括以下步骤：