[发明专利]一种仿细胞外基质可注射的原位水凝胶及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种仿细胞外基质可注射的原位水凝胶，其特征在于：按重量百分比，所述水凝胶主要由以下组分组成：

2.根据权利要求1所述的原位水凝胶，其特征在于：按重量百分比，所述水凝胶主要由以下组分组成：

3.根据权利要求1或2所述的原位水凝胶，其特征在于：所述巯基化明胶的巯基含量为0.4～0.6mmol/g；所述巯基化多糖的巯基含量为0.4～0.6mmol/g；所述聚乙二醇双丙烯酸酯的分子量为2～10KDa。

4.根据权利要求1或2所述的原位水凝胶，其特征在于：所述聚乙二醇双丙烯酸酯的摩尔含量为巯基化明胶和巯基化多糖中总巯基摩尔含量的1/4。

5.根据权利要求1或2所述的原位水凝胶，其特征在于：所述巯基化多糖为巯基化海藻酸钠、巯基化透明质酸、巯基化肝素、巯基化硫酸软骨素中的任意一种或多种；

所述溶剂为生理盐水、磷酸缓冲液、细胞培养基溶液中的任意一种或多种。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的原位水凝胶，其特征在于：所述水凝胶的组成还包括生长因子。

7.根据权利要求6所述的原位水凝胶，其特征在于：所述生长因子，在水凝胶中的含量为0.005～0.02μg/μl。

8.根据权利要求6或7所述的原位水凝胶，其特征在于：所述生长因子为骨形态发生蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子中的任意一种或多种。

9.根据权利要求6或7所述的原位水凝胶，其特征在于：所述的生长因子为骨形态发生蛋白-2和/或碱性成纤维生长因子时，巯基化明胶与巯基化多糖的质量比为1:1。

10.根据权利要求1～3或5任意一项所述的原位水凝胶，其特征在于：所述水凝胶的组成还包括含RGD的细胞粘附肽。

11.根据权利要求10所述的原位水凝胶，其特征在于：所述水凝胶中，聚乙二醇双丙烯酸酯的摩尔含量为巯基化明胶和巯基化多糖中总巯基摩尔含量的1/4与含RGD的细胞粘附肽的摩尔含量之和。

12.根据权利要求10或11所述的原位水凝胶，其特征在于：所述巯基化明胶与巯基化多糖的质量比为(5/3～3):1。

13.根据权利要求10或11所述的原位水凝胶，其特征在于：所述含RGD的细胞粘附肽，在水凝胶中的浓度为100～1000μmol/L。

14.根据权利要求10～13任意一项所述的原位水凝胶，其特征在于：所述的含RGD的细胞粘附肽，是指分子中含有RGD且分子的其中一个末端为半胱氨酸的多肽。

15.制备权利要求1～5任意一项所述水凝胶的方法，其特征在于：该方法包括由以下步骤组成：

(1)将巯基化明胶、巯基化多糖、聚乙二醇双丙烯酸酯分别溶解在所述溶剂中，分别制成巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液、聚乙二醇双丙烯酸酯溶液；

(2)分别调节巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液的pH至7.0～8.0；

(3)将巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液、聚乙二醇双丙烯酸酯溶液混合均匀，即得。

16.制备权利要求6～9任意一项所述水凝胶的方法，其特征在于：该方法包括由以下步骤组成：

(i)将巯基化明胶、巯基化多糖、聚乙二醇双丙烯酸酯分别溶解在所述溶剂中，分别制成巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液、聚乙二醇双丙烯酸酯溶液；

(ii)分别调节巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液的pH至7.0～8.0；

(iii)将巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液、聚乙二醇双丙烯酸酯溶液、生长因子混合均匀，即得。

17.制备权利要求10～14任意一项所述水凝胶的方法，其特征在于：该方法包括由以下步骤组成：

(a)将巯基化明胶、巯基化多糖、聚乙二醇双丙烯酸酯、含RGD的细胞粘附肽分别溶解在所述溶剂中，分别制成巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液、聚乙二醇双丙烯酸酯溶液、含RGD的细胞粘附肽溶液；

(b)分别调节巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液的pH至7.0～8.0；

(c)含RGD的细胞粘附肽溶液与聚乙二醇双丙烯酸酯溶液先反应5-10min，再加入巯基化明胶溶液、巯基化多糖溶液，混合均匀，即得。