[发明专利]小鼠潘氏细胞杂交瘤细胞株、制备方法及其应用

权利要求书

1.一株杂交瘤细胞株，其特征在是：该细胞株由小鼠空肠的潘氏细胞与SP2/0细胞杂交融合而得，能在细胞培养条件下持续性传代，能分泌小鼠防御素、溶菌酶及消化道干细胞促生长因子，该细胞是小鼠潘氏细胞杂交瘤GCLP细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC C2014195。

2.制备权利要求书1中所述的小鼠潘氏细胞杂交瘤GCLP细胞株的方法，该方法包括如下步骤：

（1）小鼠空肠消化道内膜细胞消化分离：将小鼠空肠取下后，用胰蛋白酶、中性蛋白酶和胶原酶的混合物进行消化，充分消化后用细胞培养液将消化离散的内膜细胞冲洗出来，配制成合适密度的细胞悬液；

（2）细胞融合：细胞悬液与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0等量混合，用PEG作融合剂，常规方法融合，在用Raw264.7细胞制作的饲养细胞层上接种融合细胞，用HAT作筛选培养基，获得消化道内膜细胞杂交细胞株；

（3）融合细胞株的分离培养与筛选：用细吸管吸出不同的融合细胞株克隆，分别培养于铺有Raw264.7细胞饲养细胞层的培养孔中进行连续传代，进行荧光桃红染色，留下那些染色阳性的细胞克隆继续培养，经CK-18抗体的潘氏细胞特异性抗原检测鉴定，选留具有潘氏细胞特异性抗原的融合细胞株株作为小鼠潘氏细胞杂交瘤GCLP细胞株继续培养并保存，建成小鼠潘氏细胞杂交瘤GCLP细胞株。

3.权利要求1中所述的小鼠潘氏细胞杂交瘤GCLP细胞株在抗菌药物生产中的应用。