[发明专利]用于非酶切非色谱纯化方法原核表达融合蛋白Prx的类弹性蛋白多肽ELP有效
| 申请号： | 201410583428.3 | 申请日： | 2014-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN104387473B | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 刘宏民;张贵星;王西新;章旭耀;王龙珍;王志茹;袁君;郑一超;赵文;郑甲信 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K14/00;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙)41104 | 代理人： | 时立新 |
| 地址： | 450001 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 非酶切非 色谱 纯化 方法 表达 融合 蛋白 prx 弹性 多肽 elp | ||
1.一类弹性蛋白多肽ELP，其特征在于，
所述的类弹性蛋白多肽ELP为ELP-IN或前体蛋白ELP-IC-PrxI，ELP-IN是类弹性蛋白与N端内含肽的组合，ELP-IC是类弹性蛋白与C端内含肽的组合；
ELP-IN的DNA序列为SEQ ID NO:3，氨基酸序列为SEQ ID NO:4；
ELP-IC的DNA序列为SEQ ID NO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2。
2.如权利要求1所述的类弹性蛋白多肽ELP组成的一对融合蛋白，其特征在于，由SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列组成。
3.如权利要求2所述的类弹性蛋白多肽ELP组成的一对融合蛋白DNA分子载体，其特征在于，分子载体为pET30a-ELP-IC-PrxI和pET28a-ELP-IN。
4.如权利要求3所述的类弹性蛋白多肽ELP组成的一对融合蛋白DNA分子载体的宿主细胞，其特征在于，宿主细胞为BL21(DE3)。
5.如权利要求1所述的类弹性蛋白多肽在原核表达融合蛋白PrxI中应用，其特征在于，采用非酶切非色谱纯化方法来纯化原核表达融合蛋白PrxI，其步骤如下：
纯化后的蛋白ELP-IN和ELP-IC-PrxI按照质量比1:1在如下体系中25℃孵育4h，25℃条件下诱导自切0.5h，然后用ITC的方法纯化获得目的蛋白PrxI；
1×Reaction buffer：50mM Tris，100mM NaCl，5％Glycerol。
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