[发明专利]一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法

权利要求书

1.一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：通过斑玉蕈菌包样品处理，测定菌包含水量、总糖含量、还原糖含量、可溶性蛋白含量及菌包中的酶活力，测定斑玉蕈菌包成熟度。

2.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的样品处理步骤为：斑玉蕈菌包培养60天开始至140天内，每隔10天取重量相差在2g以内且10天内重量减少在7g-9g的菌袋的菌包做为实验样品；将菌包每隔6cm等分成上中下三部分，各将培养料充分搅拌均匀，精确称取10 g培养料于50 mL烧杯中，加40 mL蒸馏水于25 ℃摇床摇匀2 h，取液体于50 mL离心管，9000 r/min离心15 min，上清液即为粗酶液；另称取20 g于平皿中，80 ℃烘干至恒重，测定含水量。

3.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的总糖含量测定方法：精确称取0.25 g烘干至恒重的栽培料于10 mL离心管，加入5 mL双蒸水和1.5 mL浓盐酸，沸水浴中水解3 h，静置冷却后将上清液倒入50 mL锥形瓶，重新加入5 mL双蒸水和1.5 mL浓盐酸，沸水浴中水解2 h，静置冷却后将上清并入50 mL锥形瓶中，用双蒸水洗涤定容至50 mL；

混匀后取1 mL重新定容至50 mL；然后9000 r/min离心15 min；取1 mL上清液，加入1 mL 5 %苯酚，快速加入5 mL浓硫酸，静置10 min，混匀，30 水浴20 mi；490 nm测定吸光度；样品吸光度代入标准曲线回归方程即可得样品的总糖浓度；样品总糖浓度μg/mL＝样品稀释的总糖浓度×样品稀释倍数。

4.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的含水量测定方法：使用校准后pH计测定上清液测定pH，记录平皿原始重量，每天称量平皿和样品总重量至重量不再减小则说明完全烘干，记录数据并计算含水量。

5.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的还原糖含量测定方法：精确称取烘干至恒重的栽培料0.5 g于10 mL离心管中，加入5 mL双蒸水于沸水浴中煮沸2 h，然后9000 r/min离心15 min，取1 mL上清液，加入1.5 mL DNS试剂，再沸水浴7 min，然后用冷流水冷却终止反应，用蒸馏水定容至10 mL，充分混匀，在540 nm下测吸光度值，并代入葡萄糖标准曲线回归方程查出相应的葡萄糖含量。

6.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的可溶性蛋白含量测定方法：取1 mL上清液，加入5 mL的考马斯亮蓝G-250工作液，显色10 min后，在紫外分光光度计上测定595 nm处吸光值，蒸馏水做为空白对照，样品吸光度代入牛血清白蛋白标准曲线回归方程求得样品的蛋白浓度，样品蛋白质浓度μg/ mL＝样品稀释的蛋白质浓度×样品稀释倍数。

7.根据权利要求1所述的一种斑玉蕈菌包成熟度的测定方法，其特征在于：所述的菌包中的酶活力测定方法：在520 nm下测吸光度值，并从葡萄糖标准曲线查出相应的葡萄糖含量，计算成酶活力；酶活力单位的定义为：在上述条件下每分钟水解底物生成1 μg葡萄糖所需的酶量定义为1个酶活力单位“U”。