[发明专利]一种用于Small RNA二代测序建库的接头处理方法有效
| 申请号： | 201410584267.X | 申请日： | 2014-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN105624270B | 公开（公告）日： | 2020-03-24 |
| 发明（设计）人： | 赵鑫;周鑫兰;侯勇;吴逵 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/11;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 彭家恩;罗瑶 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市盐田*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 small rna 二代 测序建库 接头 处理 方法 | ||
1.一种应用于Small RNA二代测序建库的接头处理方法，其特征在于：包括以下步骤，
A.分别在样品Small RNA片段的两端添加SE文库的3’接头和5’接头；
B.将连接好3’接头和5’接头的Small RNA片段反转录成cDNA；
C.在反转录的cDNA片段的3’末端加“A”；
D.在步骤C的cDNA片段上连接PEI文库的“Y”型接头，即获得可用于PEI文库构建的接头Small RNA片段。
2.根据权利要求1所述的接头处理方法，其特征在于：在步骤C之前，还包括对反转录成的cDNA进行回收纯化，然后将回收纯化的cDNA进行步骤C的3’末端加“A”处理。
3.根据权利要求1所述的接头处理方法，其特征在于：还包括步骤E，将步骤D的连接好“Y”型接头的cDNA片段纯化回收。
4.根据权利要求1-3任一项所述的接头处理方法在Small RNA的二代测序中的应用。
5.根据权利要求1-3任一项所述的接头处理方法在RNA样品的二代测序中的应用。
6.一种用于Small RNA二代测序的建库方法，其特征在于：包括采用权利要求1-3任一项所述的接头处理方法对Small RNA样品进行接头处理，然后对接头处理好的样品进行文库PCR扩增，回收纯化PCR扩增产物即获得文库样本。
7.根据权利要求6所述的建库方法在Small RNA的二代测序中的应用。
8.根据权利要求6所述的建库方法在RNA样品的二代测序中的应用。
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