[发明专利]能防治樱桃病害的生物杀菌剂及所用菌

说明书

技术领域

本发明属于樱桃病害防治技术领域，具体地说涉及生物防治领域中一种防治樱桃病害的生物杀菌剂及所用菌。

背景技术

樱桃(Cerasus pseudocerasus)属于蔷薇科落叶乔木果树，在我国栽培历史悠久，是落叶果树中成熟期最早的树种之一。近年来，为了实现城乡经济统筹协调发展和富民增收的目标，农业产业结构不断调整，浙江省大力发展特色优质水果，樱桃的种植面积不断增加、生产规模日益扩大。

樱桃在果品中成熟期最早，被誉为“春果第一枝”，其果实色泽鲜艳，晶莹美丽，营养丰富，外观和内在品质俱佳，被誉为“果中极品”，具有极高的经济价值，含有维生素A、B、C及钙、磷、铁等矿物质元素。尤其铁元素的含量每百克樱桃中可达到59毫克，居水果首位。

但是，近年来随着樱桃种植面积的不断扩大，各种病害也相继发生，且有逐年加重的趋势。穿孔病是樱桃树上最常见的叶部病害之一，发病率高，危害严重。其发病部位病斑部分组织脱落，形成穿孔。在沿海、沿湖和排水不良的果园及多雨年份发生严重。易造成大量落叶，减少营养积累，影响花芽的形成，导致当年减产，果实品质差。而且对第二年的产量和品质也有较大影响。当前国内外对樱桃穿孔病的治理主要是以增强果园管理和传统农药防治为主，农药的广泛使用对防治有害生物和提高农业经济效益都起到了不可忽视的作用。

但是随着化学农药的大量使用，农药对果品和果园环境的污染越来越严重，病虫害防治与农药污染的矛盾已成为果树生产中亟待解决的问题。同时，随着人们对食品安全和环境保护意识的增强，化学类杀菌剂的使用范围也越来越受到限制。因此从可持续发展的角度出发，开发新型、高效且安全的有机、绿色的生物杀菌剂具有重大的社会意义和广阔的应用前景。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种防治樱桃穿孔病害的生物杀菌剂。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种解淀粉芽孢杆菌菌株BA-07，为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BA-07，其保藏号为：CGMCC NO.8466。

本发明还同时提供了上述解淀粉芽孢杆菌菌株BA-07的用途：用于制备能防治樱桃病害的生物杀菌剂。

作为本发明的解淀粉芽孢杆菌菌株BA-07的用途的改进：所述樱桃病害为叶片细菌性穿孔病害。

本发明还同时提供了能防治樱桃病害的生物杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：

1)、斜面菌种：

将保藏号为：CGMCC NO.8466的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BA-07在PDA斜面上于27.5～28.5℃培养46～50h(较佳为28℃培养48h)；

备注：取出后于4℃冰箱中保存，严防杂菌污染；

2)、平板活化：

将上述PDA斜面培养所得(保存)的菌种接种到平板培养基上，所述平板培养基为PDA培养基；培养条件为27.5～28.5℃培养46～50h(较佳为28℃培养48h)，且于相同条件下重复传代培养两次(即，共培养2次)；

3)、液体发酵种子：

以NB培养基作为种子培养基；

将活化所得的菌种接种到装有NB培养基的摇瓶中，于27.5～28.5℃(较佳为28℃)、150～250rpm(较佳为200rpm)振荡器中培养22～26h(较佳为24h)；得液体发酵种子；

4)、液体发酵

将上述液体发酵种子以2％(体积％)的接种量接种于NB培养基中，在27.5～28.5℃(较佳为28℃)、150～250rpm(较佳为200rpm)振荡器中培养22～26h(较佳为24h)，得发酵液；

备注说明：步骤3)和步骤4)均为“有氧无菌培养”，即，满足“透气”的条件；

5)、离心过滤：

将上述步骤4)所得的发酵液在7000～9000rpm条件下离心9～11min(较佳为8000rpm条件下离心10min)，去除沉淀得到上清液，所得上清液为能防治樱桃病害的生物杀菌剂。

在本发明中，PDA培养基和NB培养基均属于常规培养基。例如，NB培养基为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000ml，调pH7.0-7.2，121℃灭菌20min。