[发明专利]抗肿瘤药物X-TOA的制备方法及其应用

说明书

本发明提供了一类具有结构通式1的化合物的制备方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明由抗癌先导化合物TOA(专利201110055102.X)3位羟基与氨基酸的羧基通过酯键缩合而成；与TOA相比，该类化合物对肝癌、结肠癌、宫颈癌、胃癌等细胞系具有显著地抑制作用；与顺铂相比，对正常细胞毒性较小；同时，其水溶性与TOA相比有明显改善；特别适合制备治疗肿瘤的药物。

技术领域

本发明涉及药物化学及药理学领域，具体涉及到X-TOA结构通式及其合成和应用，药理实验证明该类化合物具有明显的抗肿瘤作用，对正常细胞毒性很小；相比前体化合物TOA在对肿瘤的细胞的毒性得到提高，同时，改善其亲水性。可用于制备预防和治疗肝癌等癌症.

X-TOA结构通式

其中，R代表甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、肌氨酸、焦谷氨酸、色氨酸和丝氨酸。

背景技术

中国专利ZL201110055102.X公开了抗癌先导化合物TOA，药效学实验表明，先导物TOA能较显著抑制多种肿瘤细胞的体外增殖，而对正常细胞毒性较低；体内对S180小鼠肉瘤的生长有显著抑制活性，并可提高荷瘤小鼠的脾指数，均呈剂量依赖关系。通过计算肿瘤横截面积，可以清晰观察到肿瘤体积、肿瘤横截面积比明显缩小，而毒副作用又显著低于环磷酰胺。对肿瘤凋亡NF-κB信号通路研究发现，TOA给药后可以显著降低肉瘤小鼠P65、COX-2和VEGF的表达，并可抑制金属蛋白酶-2的活性；此外，TOA还可明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管增生，具有抗血管生成的作用。单日连续给予TOA最大耐受量6000mg·kg^-1，观察14天内，小鼠未出现毒性反应，优于环磷酰胺。然而，TOA水溶性差的缺点影响其口服吸收利用度。通过制剂学方法(如脂质体、微乳)对TOA进行包合，其生物利用度得到明显改善；TOA/PVP固体分散体溶出率显著提高，其相对生物利用度提高4倍；TOA微乳的相对生物利用度也提高了57倍。然而，通过化学方法改善TOA水溶性并提高生物活性的研究尚未开展。大量研究表明，氨基酸具有亲水性，在改善疏水性药物的水溶性、提高生物活性方面具有较好的作用。

本发明以抗肿瘤先导化合物(TOA)及氨基酸为起始原料进行化学拼合合成本发明化合物。对该类化合物的活性评价主要围绕抗肿瘤活性展开，分别测试了类似物对4种癌症细胞系(HepG2、HT-29、Hela、BGC-823)及犬肾上皮细胞(MDCK)的细胞毒活性；通过计算机软件模拟组合物的ClogP；另外，通过Giemsa及DAPI染色的方法评价G-TOA对HePG2细胞形态的影响。

发明内容

本发明的目的之一是提供化合物X-TOA结构通式(式1)。

本发明的目的之二是提供X-TOA的制备方法。

本发明的目的之三是提供X-TOA在制备抗肿瘤药物中的应用。

其中，R代表甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、肌氨酸、焦谷氨酸、色氨酸和丝氨酸。

本发明化合物编号及结构式如下：

本发明化合物按如下三种方法制备：

(1)将TOA溶于有机溶剂，与Boc-氨基酸在缩合剂、催化剂条件下缩合，然后酸性条件中脱Boc-保护基生成G-TOA、A-TOA、P-TOA、L-TOA、I-TOA、V-TOA；