[发明专利]焦磷酸测序法同时检测E2A-PBX1、TEL- AML1和MLL-AF4融合基因的引物对及试剂盒在审

专利信息
申请号: 201410589115.9 申请日: 2014-10-28
公开(公告)号: CN104328178A 公开(公告)日: 2015-02-04
发明(设计)人: 邵棠;李玲;陈庆;段彪 申请(专利权)人: 邵棠
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 肖明芳
地址: 江苏省南京市江宁国家高新园*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 磷酸 测序法 同时 检测 e2a pbx1 tel aml1 mll af4 融合 基因 引物
【权利要求书】:

1.一种焦磷酸测序法同时检测E2A-PBX1、TEL-AML1和MLL-AF4融合基因的引物对,其中,所述的MLL-AF4融合基因包括MLL-AF4(e9/e5)、MLL-AF4(e9/e4)和MLL-AF4(e10/e4)中的任意一种或几种,其特征在于,所述引物对包括:

(1)对于E2A-PBX1基因,

扩增引物为:

上游引物:5′-GGCCTCCCGACTCCTACA-3′,

下游引物:5′-CTGGGGGTCTGTGGGTTC-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物为:

5′-GCTCCTCGGATACTCAA-3′;

(2)对于TEL-AML1基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-CCATGCCCATTGGGAGAATAG-3′,

下游引物:5′-TCGTGGACGTCTCTAGAAGGATTC-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-GATTCATTCCAAGTATGC-3′

(3)对于MLL-AF4(e9/e5)和MLL-AF4(e9/e4)基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-CCGCCCAAGTATCCCTGTAAAAC-3′,

下游引物:

5′-AGCGGCTTCACTCAGACCCTAAAGGAGGCGGCCATGAA-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-AAAACAAAAACCAAAAGA-3′

(4)对于MLL-AF4(e10/e4)基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-TCTCCAATGGCAATAGTTCTAAGC-3′,

下游引物:5′-GCTCAGCTGTACTAGGCGTATGT-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-TGGACTTCATTGGAGTAG-3′。

2.一种焦磷酸测序法同时检测E2A-PBX1、TEL-AML1和MLL-AF4融合基因的试剂盒,所述的MLL-AF4融合基因包括MLL-AF4(e9/e5)、MLL-AF4(e9/e4)和MLL-AF4(e10/e4)中的任意一种或两种,其特征在于,所述试剂盒包含如下引物:

(1)对于E2A-PBX1基因,

扩增引物为:

上游引物:5′-GGCCTCCCGACTCCTACA-3′,

下游引物:5′-CTGGGGGTCTGTGGGTTC-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物为:

5′-GCTCCTCGGATACTCAA-3′;

(2)对于TEL-AML1基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-CCATGCCCATTGGGAGAATAG-3′,

下游引物:5′-TCGTGGACGTCTCTAGAAGGATTC-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-GATTCATTCCAAGTATGC-3′

(3)对于MLL-AF4(e9/e5)和MLL-AF4(e9/e4)基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-CCGCCCAAGTATCCCTGTAAAAC-3′,

下游引物:

5′-AAAGGAGGCGGCCATGAA-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-AAAACAAAAACCAAAAGA-3′

(4)对于MLL-AF4(e10/e4)基因:

扩增引物为:

上游引物:5′-TCTCCAATGGCAATAGTTCTAAGC-3′,

下游引物:5′-GCTCAGCTGTACTAGGCGTATGT-3′,

其中下游引物的5′端进行生物素标记;

测序引物:

5′-TGGACTTCATTGGAGTAG-3′。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括质控品,所述质控品包括阳性对照品和阴性对照品。

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