[发明专利]一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印 迹-拉曼联用检测方法。

背景技术

作为一种常用的磺胺类抗菌剂，磺胺二甲嘧啶被广泛用于预防和治疗奶 牛的细菌感染性疾病。因其在动物体内的作用时间和代谢时间较长，易残留 在动物的组织中，进而进入动物分泌物中(如乳汁)。长期饮用磺胺类药物残 留过高的乳制品，将对人体、特别是婴幼儿的健康造成严重后果。目前，牛 奶中磺胺类药物残留的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、 气-质联用法(GC/MS)、液-质联用法(LC/MS)等。现有的方法虽具有灵敏度 高、检出限低等优点，但因仪器昂贵、耗时长、检测成本高等而难以满足食 品安全问题频发的现状。因此，开发一种低成本、满足现场快速检测的新方 法极为必要。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉 曼联用检测方法，通过分子印迹技术制备对磺胺二甲基嘧啶具有特异性识别 作用的水凝胶，待测样品经水凝胶吸附富集后，利用便携式拉曼光谱仪进行 光谱采集，通过与磺胺二甲基嘧啶的标准拉曼光谱相对比，判断样品中是否 含有此药物。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检测方法，包括如下步骤：

S1、制备磺胺二甲嘧啶分子印迹水凝胶：分别取0.017g磺胺二甲嘧啶 (模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能单体)、3.0g丙烯酰胺(功能单体)、0.09 gN’N-亚甲基双丙烯酰胺(交联剂)、0.09g过硫酸铵(引发剂)和4.0ml 去离子水(溶剂)于烧杯中充分混合，经氮气除氧后，将其填充到由两片载 玻片形成的夹板空间中，置于60℃的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的磺胺 二甲嘧啶印迹水凝胶；

S2、去除模板分子：将由步骤S1所得的印迹水凝胶浸泡在10％的醋酸溶 液中，并超声振荡5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；

S3、将不同浓度的磺胺二甲嘧啶储备液分别加入10ml本身不含磺胺二 甲嘧啶的牛奶中，使所得溶液中磺胺二甲嘧啶的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、 0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；

S4、将步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S3中所得的含不同浓度磺 胺二甲嘧啶的牛奶中，约5min后(达到吸附平衡)，将其取出并用去离子水 漂去多余的牛奶；

S5、用便携式拉曼光谱仪对步骤S4所得的溶液进行检测，将所得光谱与 磺胺二甲嘧啶的标准拉曼光谱进行比对，判断样品中是否含有磺胺二甲嘧啶。

本发明具有以下有益效果：

本发明能够快速、低成本检测牛奶中过量的磺胺二甲嘧啶。通过分子印 迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中磺胺二甲嘧啶的吸 附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且 水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点， 并可满足现场、高通量检测的需求。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进 行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发 明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供了一种牛奶中磺胺二甲嘧啶的分子印迹-拉曼联用检 测方法，包括如下步骤：

S1、制备磺胺二甲嘧啶分子印迹水凝胶：分别取0.017g磺胺二甲嘧啶 (模板分子)、1.4ml丙烯酸(功能单体)、3.0g丙烯酰胺(功能单体)、0.09 gN’N-亚甲基双丙烯酰胺(交联剂)、0.09g过硫酸铵(引发剂)和4.0ml 去离子水(溶剂)于烧杯中充分混合，经氮气除氧后，将其填充到由两片载 玻片形成的夹板空间中，置于60℃的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的磺胺 二甲嘧啶印迹水凝胶；

S2、去除模板分子：将由步骤S1所得的印迹水凝胶浸泡在10％的醋酸溶 液中，并超声振荡5min，以去除其中的模板分子磺胺二甲嘧啶；