[发明专利]氯喹在制备抗疱疹病毒药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及自噬反应抑制性药物氯喹在医药中的新应用，更具体地，涉及氯喹对γ-疱疹病毒及其相关疾病的应用。

背景技术

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒KSHV(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus)感染诱生的卡波氏肉瘤KS是艾滋病患者中常见的恶性肿瘤，大约20％的艾滋病病人会伴有卡波氏肉瘤，并且AIDS-KS病人死亡率极高，其5年生存率只有约8％。正常人群中KSHV感染后95％以上个体不表现出临床症状和患病。但在免疫抑制的患者，如艾滋病患者、器官移植患者和放化疗患者中，KSHV有很高的感染率和极大的危害，感染可以导致卡波氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma，KS)、原发渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphoma，PEL)以及多中心卡斯特慢病(multicentric castleman disease，MCD)等疾病。近年来在其他疾病中(如HBV慢性肝炎、吸毒和老年性疾病)也发现很高的KSHV感染率和恶性肿瘤，正逐渐引起重视。

EB病毒(Epstein-barr virus，EBV)也是疱疹病毒家族中的一员，与KSHV同属于γ-疱疹病毒。目前EBV感染全球90％以上的人群，与多种人类疾病相关，包括传染性单核细胞增多症、毛状白斑症、艾滋病相关淋巴瘤，以及实质器官移植后多发的淋巴组织增生性疾病。此外，EBV是最早发现的能导致癌症的病毒，与多种恶性肿瘤相关，如Burkitt淋巴瘤、Hodgkin氏淋巴瘤、非Hodgkin氏淋巴瘤及一些上皮组织癌症(如鼻咽癌、某些形式的胃癌等)，广州作为鼻咽癌的高发地带也引发了人们对于EBV的高度关注。

迄今为止没有专门的抗γ-疱疹病毒药物，疫苗也尚处于研发阶段。

利用自噬反应治疗γ-疱疹病毒相关疾病可能是一个很好的发展方向，Rapamycin是目前最有效KS治疗药物，该药可以显著地诱导自噬反应；虽然自噬反应在其中的具体作用尚待证实，但不可否认自噬反应在其中发挥了重要功能。同样通过多肽抑制病毒编码的自噬反应抑制蛋白vFLIP可显著抑制肿瘤的生长。这些研究表明自噬反应是非常有潜力的KSHV治疗靶点。EBV与KSHV同源性很高，RTA作为KSHV与EBV共有的裂解期即早期蛋白，是病毒顺利从潜伏期转换到裂解期的重要因素，RTA能够促进自噬反应，且一旦抑制自噬反应，从潜伏期向裂解期的转换将受到抑制。

发明内容

本发明提供自噬反应抑制剂氯喹在抗γ疱疹病毒药物中的应用。

所述的氯喹的结构式如式I所示：

所述的γ疱疹病毒为卡波氏肉瘤相关疱疹病毒或EB病毒。

氯喹(chloroquine，CQ)作为自噬抑制药物，其抑制自噬的原理是能够改变溶酶体的pH，从而抑制溶酶体与自噬体的融合，进一步影响自噬的进程。此外，氯喹能够与DNA相互作用，抑制某些基因的复制和转录。通过一系列研究发现它有抗KSHV的作用，能够抑制KSHV裂解期蛋白的表达，降低细胞内和细胞外的病毒产量，可能的机制是氯喹通过抑制自噬反应从而抑制病毒的裂解复制，另外一种可能就是氯喹能够特异性结合RTA的启动子，从而抑制裂解复制。对于EBV的抑制，氯喹仅对细胞外的病毒产量有抑制作用，这可能是氯喹造成的溶酶体pH变化，自噬体累积，抑制病毒的组装释放的作用。在之前申请过的文件中，并未涉及过关于氯喹治疗KSHV以及EBV相关疾病和应用的研究。这为进一步的抗病毒药物研发提供强有力的理论基础和实践基础，具有重要的研发价值和开发意义。

本发明具有以下优点：

(1)实验发现氯喹处理后的细胞内KSHV裂解期蛋白的表达明显降低，且细胞内外的病毒颗粒含量也有明显下降，EBV在细胞外的含量也有明显下降。

(2)这些抑制作用呈浓度依赖性，且在较低的浓度就有很好的抗病毒作用。

(3)氯喹毒性较低，在HEK-293细胞中呈现成无细胞毒性现象。

附图说明

图1：氯喹在BCBL1细胞内对KSHV潜伏期蛋白LANA、裂解期蛋白RTA、K8、ORF45、ORF64的表达的影响。

图2：氯喹在iSLK-219细胞内对KSHV相关蛋白RTA、LANA2、ORF45、K8表达的作用。

图3：氯喹对BCBL1细胞外的KSHV病毒产量的影响。

图4：氯喹对BCBL1细胞内的KSHV病毒颗粒数量的影响。

图5：氯喹对HR-1细胞外的EBV病毒产量的影响。

图6：氯喹对HR-1细胞内的EBV病毒颗粒数量的影响。