[发明专利]一种用于测序的高通量扩增质粒的方法在审
| 申请号： | 201410593687.4 | 申请日： | 2014-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN104328111A | 公开（公告）日： | 2015-02-04 |
| 发明（设计）人： | 董志;李桂澜 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 姜彦 |
| 地址： | 100871 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 通量 扩增 质粒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于测序的高通量扩增质粒的方法，包括下述步骤：
(1)、将10×phi29 DNA聚合酶缓冲液1.0μL、浓度为100μM的Hexamer引物2.5μL、待测样品0.5μL和去离子水4.9μL混合均匀，在95℃加热3分钟，然后置于冰上冷却，得到反应液(Ⅰ)；
(2)、在反应液(Ⅰ)中加入浓度为10mM的dNTP 0.5μL、100×BSA 0.1μL和phi29 DNA聚合酶0.5μL，使总反应体系为10.0μL，将其混合均匀，在30℃温育8小时，最后在65℃加热10分钟，得到反应液(Ⅱ)；
(3)、将步骤(2)中得到的反应液(Ⅱ)用灭菌去离子水稀释3-6倍后，得到可直接用于测序的DNA。
2.根据权利要求1所述的一种用于测序的高通量扩增质粒的方法，其特征在于：步骤(1)中的待测样品选自通过转化获得阳性菌落、冻存的甘油菌液或细胞培养液中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种用于测序的高通量扩增质粒的方法，其特征在于：步骤(3)中所述测序为sanger测序。
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