[发明专利]蜂胶总黄酮在治疗急性放射性肠损伤中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了蜂胶总黄酮治疗急性放射性肠损伤的一种方法，属生物医药技术领域。 

背景技术

临床治疗腹部肿瘤时，所采用的放射治疗，不仅将杀死杀伤肿瘤细胞，对正常组织细胞也具有一定的损伤性，特别是对肠管的损伤更为明显。尽管我们采取了各种防护措施，如缩小照射野的范围，降低照射剂量等等，然而放射性肠损伤发生率仍然越发增多，严重影响恶性肿瘤患者的预后和生活质量，目前主要以对症和支持治疗为主，如处理不当，甚至造成严重的迁延不愈的肠损伤。因此积极防治辐射所致急性肠黏膜损伤具有非常重要的临床意义。 

蜂胶是蜜蜂代谢合成的一种胶状固体物，含有黄酮类，萜烯类，酚类以及酯类等300多种生物活性物质，具有抗炎，抗氧化，抗辐射，抗肿瘤，提高免疫力的功效，而总黄酮是蜂胶中的主要效应物质。有研究表明蜂胶总黄酮对心肌细胞缺血再灌注和氧化应激损伤具有明显的保护作用。近年发现黄酮类物质能够抑制恶性肿瘤细胞增生并可诱导肿瘤细胞凋亡。有文献报道黄酮类物质可明显抑制前列腺癌细胞和粒细胞白血病细胞增殖，诱导凋亡增加。 

发明内容：

本发明公开蜂胶总黄酮治疗急性放射性肠损伤的一种方法，用于腹部肿瘤放疗而造成的肠管损伤的治疗方法。 

本发明通过以下实验证明蜂胶总黄酮应用于在腹部肿瘤放疗而造成的肠管损伤的治疗方法：通过建立放射性大鼠肠损伤模型，蜂胶总黄酮在防护射线引起的肠黏膜损伤的保护作用，可明显减轻大鼠照射后肠损伤症状，提高大鼠放射损伤后存活率。将大鼠随机分配入组，排除非研究因素的干扰，尽可能保证实验大鼠的同质性。照射后肠黏膜上皮细胞即有变性坏死，3天损伤达高峰，上皮细胞广泛坏死脱落，3天以后小肠黏膜进行渐进性损伤修复，所以我们选取3天时间点处死大鼠取材。采用9Gy高能X线单次腹部照射，光镜下和电镜下观察照射组小肠组织形态较正常组明显损伤，达到病理损伤标准，证实大鼠放射性肠损伤模型建立成功。 

健康清洁级大鼠，在清洁动物房内温度18～22℃，湿度50％，普通光照，用标准饲料、自由饮水，适应性喂养3天。将大鼠随机分为5组：C组正常对照组；R组单纯照射组；T1组高剂量总黄酮；T2组总黄酮低剂量组；N组阳性对照。放射性肠损伤模型的建立：给药第7天(除正常对照组)，称重后麻醉，固定，用直线加速器单次腹部照射，照射范围为剑突至耻骨联合。照射完毕待大鼠苏醒后将其放回笼内，自由活动及饮水。 

具体实施方式

下面的实例将具体说明本发明的操作方法，但不能作为对本发明的限定。 

健康清洁级8周龄SD雄性大鼠64只，体重200～250g，在清洁动物房内用标准饲料适应性喂养3d，温度18～22℃，湿度50％，普通光照，自由饮水，观察大鼠有无不良反应，进食饮水活动正常。将大鼠随机分为5组：C组正常对照组；R组单纯照射组；T1组高剂量总黄酮；T2组总黄酮低剂量组；N组NAC组设为阳性对照。 

放射性肠损伤模型的建立：给药第7天(除正常对照组)，大鼠禁食12h，不禁水，将实验大鼠(除正常对照组)逐一称重后麻醉，固定，予6MV医用直线加速器单次腹部照射，照射范围为剑突至耻骨联合。照射完毕待大鼠苏醒后将其放回笼内，自由活动及饮水。所有大鼠照射后第3天禁食12h后处死取材。 

检测指标：一般情况观察：饮食及精神状态，有无腹泻(粪便性状及频率)及血便，体重变化。 

1肠黏膜病理组织形态观察：麻醉后在无菌状态下迅速打开腹腔，在回盲部近端10cm处取一段小肠 组织，沿肠系膜纵轴剪开，预冷无菌生理盐水冲洗，取回盲肠近端肠组织固定，制成超薄切片，透射电镜下观察肠黏膜细胞超微结构(线粒体改变，微绒毛高度及其损伤改变)。另取回肠末端组织固定24h，脱水、包埋、切片、HE染色，置于光镜下观察肠黏膜及绒毛组织形态学变化。