[发明专利]一种鉴别冬虫夏草存储时间的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中草药分析领域，具体涉及一种冬虫夏草存储时间的鉴别方法。

技术背景

冬虫夏草系麦角菌科真菌冬虫夏草菌(Cordyceps sinensis)寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。由于冬虫夏草具有免疫调节、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老等功能，被视为珍贵的中药材，闻名世界。近年来，虽然冬虫夏草资源稀缺，价格昂贵，但其仍以其多种药用功效而备受关注。

虫草的储藏要点是防潮、防蛀和防虫。虫草常用的储藏方式是用密封容器放在阴凉干燥处，还可以向容器内添加干燥剂。有文献报道，在一般的贮藏条件下，冬虫夏草的保质期为2-3年。理论上来说，采用相同的保存方法，冬虫夏草保存的时间越久，里面所含各种有效成分流失的可能性与流失的量就越大，其药用价值就越低。冬虫夏草的交易市场上，两年以上的旧虫草明显比新虫草价格低。

目前市场上辨别冬虫夏草存储时间的方法主要为经验鉴别，通过观察其外表色泽来辨别，这些方法依赖于经验，准确度不好把握。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于利用现代分析手段，建立快速鉴别冬虫夏草存储时间的方法。

麦角甾醇为冬虫夏草的特征成分，其本身在365nm紫外灯下检视无特征荧光斑点，当冬虫夏草在室温下放置一定时间后，麦角甾醇会发生转化，转化物质在紫外灯下检视为黄绿色荧光斑点。因此，利用这一性质，结合本发明人长期实验统计经验，本发明提供一种简易廉价的方法，可以快速地大致判断冬虫夏草的存在年限。

本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种鉴别冬虫夏草存储时间的方法，其特征在于，包含以下步骤：

1)有机溶液提取冬虫夏草粉末，过滤或离心后，浓缩；

2)将1)中所得溶液和麦角甾醇对照品溶液进行薄层层析；

3)取出薄层板，加热，紫外光灯下检视，根据斑点的位置和亮度进行判断。

在一些实施方案中，本发明所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙腈或其组合。

在另一些实施方案中，本发明所述有机溶剂为甲醇。

在一些实施方案中，本发明步骤2)中所述薄层层析方法的展开剂为弱极性溶剂-中等极性溶剂-酸的组合，其中弱极性溶剂选自石油醚、正己烷，中等极性溶剂选自甲酸乙酯，酸选自甲酸。

在一些实施方案中，本发明步骤2)中所述薄层层析方法的展开剂弱极性溶剂-中等极性溶剂-酸的体积比为15:5:1。

在一些实施方案中，本发明步骤3)中所述紫外光灯的波长为365nm。

在一些实施方案中，本发明所述判断的依据为：以麦角甾醇对照品的斑点为参照，若供试品图谱中与麦角甾醇对照品斑点平行位置出现的斑点Ⅱ与此斑点上方的斑点Ⅲ相比，a.斑点Ⅱ比斑点Ⅲ亮度强，则为6个月以内冬虫夏草；b.斑点Ⅱ亮度与斑点Ⅲ亮度相当，则为6个月至13个月以内冬虫夏草；c.斑点Ⅱ亮度比斑点Ⅲ亮度弱，则为13个月至24个月以内冬虫夏草；d.无斑点Ⅱ，只有斑点Ⅲ，则为24个月以上冬虫夏草。

本发明的优点是：

首次提出了一种鉴别冬虫夏草存储时间的方法，鉴别手段无需使用贵重的分析仪器，利用薄层色谱就能快速评判冬虫夏草的已存在月份。

本发明的详细说明

定义和一般术语

本发明使用的定义“展开剂”的作用是使被分析物质可以在薄层板上得以分离，常用组合是石油醚(或正己烷)：甲酸乙酯：甲酸，一般取上层溶液，各种溶剂也可以用各极性相似的溶剂来替代。展开剂组合的常用比例是15:5:1，此比例有较宽的耐用范围，在本领域技术人员公知的范围内，使用相似溶剂以耐用范围内的比例组合作为展开剂都是可行的。

本发明所述“麦角甾醇对照品”，本发明使用甲醇溶解麦角甾醇对照品制得，其麦角甾醇使用量也有一定的耐用范围，相对而言，使用0.3-0.4mg/mL浓度的麦角甾醇溶液作为对照品，有利于斑点Ⅱ和斑点Ⅲ之间的亮度差异的肉眼判断。

本发明使用的定义“斑点Ⅱ”和“斑点Ⅲ”，其中“斑点Ⅱ”表示使用本发明方法，有机溶剂提取样品进行薄层层析后，与麦角甾醇对照品斑点平行位置出现的斑点，由于和麦角甾醇对照品出现的位置一样，因此判断该斑点的主要物质为麦角甾醇，它们通过加热或长时间放置，麦角甾醇发生转化，在紫外灯下检视到黄绿色的荧光斑点。若不通过长时间置放或加热，麦角甾醇在紫外灯下检视无特征斑点。“斑点Ⅲ”属于冬虫夏草内麦角甾醇转化的产物，薄层层析后，在紫外灯下检视为黄绿色的荧光斑点。