[发明专利]一种用于腹壁缺损的生物修复材料及其制备方法

权利要求书

1.一种用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

(1)前期处理：取已死亡动物的腹直肌肌肉组织，冲洗除去表面的血凝块，在无菌条件下剔除表面的脂肪组织和筋膜组织，再次冲洗；

(2)脱细胞处理：将上述前期处理后的腹直肌肌肉组织进行反复冻融，然后漂洗，浸入到质量浓度为1～10％的烷基糖苷溶液中，常温下振荡12～24小时；将烷基糖苷废液倒掉，冲洗；再加入含DNA酶和RNA酶的MgCl₂溶液中，在37℃下振荡24～36小时，将组织取出，冲洗后进行冻干处理，制得骨骼肌脱细胞基质生物薄片；

(3)消化：将上述骨骼肌脱细胞基质生物薄片研磨成粉末后溶于胃蛋白酶溶液中，并使骨骼肌脱细胞基质的浓度为5～10mg/ml；然后在常温下振荡至肉眼观察到溶液呈均匀云雾状时，加入中和液使PH值调整为7.4，再进行冻干处理，得到骨骼肌脱细胞基质微粒；

(4)静电纺丝：将上述骨骼肌脱细胞基质微粒与聚已内酯混合，并溶于六氟异丙醇中配置成共混液，所述骨骼肌脱细胞基质微粒与聚已内酯的质量之和为共混液质量的10％，且所述聚己内酯的质量为所述骨骼肌脱细胞基质微粒质量的25％～75％；将共混液置于静电纺丝装置中进行纺丝，制得聚已内酯/骨骼肌脱细胞基质共混静电纺丝纤维膜，烘干后即为用于腹壁缺损的生物修复材料。

2.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中取已死亡动物的腹直肌肌肉组织时，供体动物为牛或猪，取材时间为动物死亡后30分钟内。

3.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的两次冲洗操作所采用的冲洗液为含有链霉素和青霉素的去离子水或PBS缓冲液；所述青霉素在所述冲洗液中的浓度为100μg/ml、所述链霉素在所述冲洗液中的浓度为100μg/ml。

4.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的反复冻融的方法为：将所述腹直肌肌肉组织置于-80℃冰箱3～6小时，然后取出放在37℃水浴箱中30～60分钟；反复冻融的次数为3次。

5.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的含DNA酶和RNA酶的MgCl₂溶液，由DNA酶和RNA酶溶于0.05mol/L的MgCl₂溶液中配置而成；其中，DNA酶的浓度为100～200μg/ml，RNA酶的浓度为100～200μg/ml。

6.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的胃蛋白酶溶液由胃蛋白酶溶于0.01mol/L的HCl中配制而成，所述胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶的浓度为1mg/ml。

7.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的中和液为0.01mol/L的NaOH溶液。

8.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述聚已内酯的分子量为14000。

9.根据权利要求1所述的用于腹壁缺损的生物修复材料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中进行静电纺丝时，纺丝温度为20～25℃，相对湿度为45～55％。

10.一种用于腹壁缺损的生物修复材料，所述生物修复材料根据权利要求1至9中的任一项所述的方法制备得到。