[发明专利]同时检测蔬菜和水果中7种杀软体动物剂的LC-MS/MS测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同时检测果蔬中多种农药残留的方法，具体涉及一种可同时对蔬菜和水果中7种杀软体动物剂进行定量测定的LC-MS/MS方法。

背景技术

防治蜗牛、田螺、钉螺等有害软体动物的农药叫做杀软体动物剂。由于硫酸铜和砷酸钙等无机杀软体动物剂已停用，有机杀软体动物剂为目前化学防治软体动物的主要手段。有机杀软体动物剂按化学结构分为下列几类：①酚类：如五氯酚钠、杀螺胺；②吗啉类：如蜗螺杀；③有机锡类；④沙蚕毒素类：如杀虫环(杀虫丁)；⑤其它：如四聚乙醛、灭梭威、烟酰苯胺。其中，五氯酚钠、蜗螺杀由于毒性极大，污染环境，已被禁用。杀螺胺、杀虫环、灭梭威、四聚乙醛等虽然毒性中等或较低，但其广泛使用亦导致人畜中毒的事例时有发生，已公开期刊文章“陆慧宁，任三香，祝亚非，等.有毒汤样中微量农药杀虫环的鉴定[J].分析测试学报，2002，21(3):78-89”公开了一种可以鉴定杀虫环的方法，但是仅仅可以定性测定，并不能达到定量检测的目的。同时，此类药物可在农作物、环境及水生生物中大量残留，最终威胁人类健康。我国GB2763-2012规定了叶菜中的四聚乙醛残留限量是1.0mg/kg；糙米中的四聚乙醛残留限量是0.2mg/kg；大米中的杀虫环为0.2mg/kg。杀虫环在日本肯定列表中限量为0.050mg/kg。日本对灭梭威在红小豆、绿豆中限量为0.050mg/kg。

目前，关于杀软体动物剂残留量检测的研究较少。日本公布了灭梭威的液相色谱(HPLC)检测方法(JAP-073)。国内有用气相色谱法(GC-ECD)检测杀虫环的报道；有用LC-MS/MS检测灭梭威的报道，是针对河豚鱼、鳗鱼和对虾等高蛋白基质水产品的；用气相色谱法和LC-MS/MS法检测四聚乙醛的报道，只针对蔬菜基质，且前处理方法较繁琐耗时，成本高；“四聚乙醛在烟草和土壤中的残留量检测与消解动态”公开了检测烟草和土壤中四聚乙醛的测定方法，但上述方法检测种类比较单一，只涉及一种或两种杀软体动物剂，或前处理方法尚需进一步完善；本作者曾建立了LC-MS/MS检测杀虫环、四聚乙醛、灭梭威的方法，该方法检测目标物只涉及三种杀软体动物剂，且前处理方法尚需进一步完善。因此，建立一种快速、灵敏、准确的杀螺胺、杀虫环、蜗螺杀、烟酰苯胺、五氯酚钠、灭梭威、四聚乙醛7种杀软体动物剂同时检测方法变得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种蔬菜和水果中7种杀软体动物剂的同时定量测定方法。

本发明建立的液质串联检测方法采用一次色谱过程分析蔬菜和水果中的7种杀软体动物剂残留量，包括杀螺胺、杀虫环、蜗螺杀、烟酰苯胺、五氯酚钠、灭梭威、四聚乙醛。

本发明所采用的技术方案为：

同时检测蔬菜和水果中7种杀软体动物剂的LC-MS/MS测定方法，其特征是，

所述的7种杀软体动物剂为杀螺胺、杀虫环、蜗螺杀、烟酰苯胺、五氯酚钠、灭梭威、四聚乙醛；

具体包括以下步骤：

(1)提取：取果蔬样品，置于离心管中，加入乙腈，在匀浆机中高速匀浆1min，再加入2.0-5.0g氯化钠于离心管中，再次匀浆，将离心管置于离心机中，离心，吸取上清液置于离心管中，然后将离心管置于40℃水浴中氮气吹近干，加入乙腈溶解残渣涡流，得待净化溶液；

(2)净化：向步骤(1)制得的待净化溶液中加入0.05-0.30g PSA粉和0.05-0.30g C18粉于离心管中，涡流，离心，取上清液，置于另一离心管中氮气吹近干，用甲醇定容，涡流混合后过0.22μm滤膜，即得待测样品；

(3)检测：待步骤(2)得到的测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定。

优选的，具体包括以下步骤：

(1)提取：称取10.00g果蔬样品，置于50mL离心管中，准确加入20mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆1min，再加入2.0-5.0g氯化钠于离心管中，再次匀浆1min，将离心管置于离心机中，3000r/min离心5min，吸取上清液10mL于10mL离心管中，置于40℃水浴中氮气吹近干，准确加入2.0mL乙腈溶解残渣涡流2min待净化，得待净化溶液；

(2)净化：向步骤(1)制得的待净化溶液中加入0.05-0.30g PSA粉和0.05-0.30g C18粉于离心管中，涡流2min，离心，取1.0mL上清液，置于另一10mL离心管中氮气吹近干，用甲醇定容至1.0mL，涡流混合后过0.22μm滤膜，即得待测样品；