[发明专利]转氨酶及其应用有效
申请号: | 201410606252.9 | 申请日: | 2014-10-31 |
公开(公告)号: | CN104328094B | 公开(公告)日: | 2017-08-04 |
发明(设计)人: | 洪浩;高峰;李艳君;张艳;李少贺 | 申请(专利权)人: | 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司;凯莱英生命科学技术(天津)有限公司;天津凯莱英制药有限公司;凯莱英医药化学(阜新)技术有限公司;吉林凯莱英医药化学有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司11240 | 代理人: | 董文倩,吴贵明 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转氨酶 及其 应用 | ||
1.一种转氨酶,其特征在于,所述转氨酶的氨基酸序列为选自如下序列之一的序列:
如SEQ ID NO:2或4所示的氨基酸序列;
将SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的第38位上的亮氨酸替换为异亮氨酸的氨基酸序列。
2.一种核苷酸,其特征在于,所述核苷酸编码权利要求1所述的转氨酶。
3.根据权利要求2所述的核苷酸,其特征在于,所述核苷酸的序列为选自如下序列之一的序列:
SEQ ID NO:1或3所示的核苷酸序列。
4.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体中有效连接有权利要求2或3所述的核苷酸。
5.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞转化或转染有权利要求4所述的重组载体。
6.一种合成手性胺的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:使酮类化合物、权利要求1所述的转氨酶,磷酸吡哆醛和氨基供体在反应体系中反应,由此获得手性胺。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述酮类化合物为其中,R1和R2各自独立地为C1~C8烷基、C5~C10环烷基、C5~C10芳基或C5~C10杂芳基,或者R1和R2与羰基上的碳共同形成C5~C10杂环基、C5~C10碳环基或C5~C10杂芳基,所述C5~C10杂环基和C5~C10杂芳基中的杂原子各自独立地选自氮、氧和硫中的至少一种,所述C5~C10芳基中的芳基、C5~C10杂芳基中的杂芳基、C5~C10碳环基中的碳环基或C5~C10杂环基中的杂环基各自独立地未被取代或被卤素、烷氧基或烷基中的至少一个基团所取代。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述酮类化合物选自
9.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,所述反应体系中还含有促溶剂,所述促溶剂为二甲基亚砜或聚乙二醇。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述聚乙二醇为PEG-400。
11.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述C1~C8烷基为C1~C8直链烷基,所述C5~C10杂芳基为吡啶基团,所述烷氧基为C1~C6烷氧基,所述C5~C10杂环基中的杂环基为哌啶,所述C5~C10芳基中的芳基、C5~C10杂芳基中的杂芳基、C5~C10碳环基中的碳环基或C5~C10杂环基中的杂环基上的取代基各自独立为C1~C6直链烷基、C1~C6烷氧基,所述氨基供体为异丙胺或D-丙氨酸。
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