[发明专利]可分泌抗II型登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，尤其是涉及一种可分泌抗II型登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。

背景技术

登革病毒属于黄病毒科黄病毒属，主要通过埃及伊蚊传播，登革病毒包括4种血清型(I～IV型)，任何型别的登革病毒感染均可引起一系列的临床症状，表现为隐形感染、发热、登革热或更为严重的登革出血热和登革休克综合征。登革病毒主要流行于热带和亚热带地区，目前，全球有超过100个国家报告了登革热疫情，25亿人生活在感染的高危地区，每年有5千万～一亿的病例报告，其中有20万～50万例登革热感染成为登革出血热。在登革疫区中，多见4型登革病毒交替流行，更增加了不同型别反复感染的危险性。从发病率、死亡率和经济成本来说，登革热是世界上通过蚊媒传播的最严重的病毒性疾病。初次感染登革病毒所获得的免疫力对于同型病毒的再次感染可产生终身的免疫保护作用，但是对于其它型别登革病毒的再次感染仅能产生部分而且短暂的免疫保护作用。由于存在抗体依赖的感染增强作用，异型登革病毒再次感染是发生登革出血热/登革休克综合征的主要危险因素。

登革病毒基因组为单股正链RNA，由11000个核苷酸组成，病毒有3种结构蛋白和7种非结构蛋白。编码结构蛋白的基因区集中于5’端，编码非结构蛋白的基因区位于3’端，其顺序为：5’C–PreM–M–E-NS1-NS2a-NS2b-NS3-NS4a-NS4b-NS5-3’。目前使用的登革热诊断试剂主要是以全病毒或者重组E蛋白为抗原，检测抗登革病毒的IgM和IgG抗体。由于黄病毒结构蛋白之间具有共同抗原决定簇，存在交叉反应，用登革病毒结构蛋白为抗原的诊断试剂不能很好地满足临床诊断需要。NS1蛋白是登革病毒的一种非结构糖蛋白，在登革发病早期的血清中可以检测到登革病毒NS1蛋白，且其出现时间早于IgM抗体，因此检测急性期病人血清中的NS1抗原可用于早期诊断登革病毒感染。并且，有研究表明及早的临床处理可以减少登革出血热的发病率和致死率，那么，在尚未成功研制具有保护性的登革病毒疫苗和建立具有特异性的治疗措施以前，登革热的早期诊断就显得尤为重要。

发明内容

基于此，有必要提供一种可以用于II型登革病毒早期检测的II型登革病毒检测试剂盒，以及可应用在该II型登革病毒检测试剂盒中的可分泌抗II型登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。

一种可分泌抗II型登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C2014183。

上述的杂交瘤细胞在制备II型登革病毒检测试剂或II型登革病毒检测设备中的应用。

在一个实施例中，所述抗II型登革病毒NS1单克隆抗体记为DN2-25，DN2-25作为检测抗体。

一种可分泌抗II型登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C2014182。

上述的抗II型登革病毒NS1单克隆抗体在制备II型登革病毒检测试剂或检测设备中的应用。

在一个实施例中，所述抗II型登革病毒NS1单克隆抗体记为DN2-9，DN2-9作为捕获抗体。

一种II型登革病毒检测试纸，包括上述的DN2-25和如权利要求6所述的DN2-9。

在一个实施例中，包括支撑薄片、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫、检测线及质控线，所述样品垫、所述金标垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸收垫从所述支撑薄片的一端向另一端依次设置在所述支撑薄片上，所述样品垫与所述金标垫部分重叠，所述金标垫与所述硝酸纤维素膜部分重叠，所述硝酸纤维素膜与所述吸收垫部分重叠，所述检测线及所述质控线设在所述硝酸纤维素膜上，且所述检测线设在靠近所述金标垫的一端，所述质控线设在靠近所述吸收垫的一端，所述金标垫上涂覆有DN2-25包附胶体金颗粒形成的胶体金标记的单克隆抗体，所述检测线为DN2-9，所述质控线为羊抗鼠IgG抗体。

一种II型登革病毒检测试剂盒，包括上述的II型登革病毒检测试纸。

上述杂交瘤细胞的分泌产量高，分泌得到的抗登革病毒NS1单克隆抗体具有高敏感性、高特异性等优点，可广泛应用在制备登革热早期分型诊断的检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，可以实现准确、快速地检测出II型登革病毒，而与其它I型、III型和IV型登革病毒无交叉，有利于对II型登革病毒作出早期分型诊断，且在特异性、灵敏度等方面较之传统的检测方法具有显著的优势，可以应用于II型登革病毒早期检测。

附图说明