[发明专利]具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体。

背景技术

鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)是导致小鹅瘟的病原体，又名小鹅瘟病毒。该病原体感染机体后引起以渗出性肠炎、心脏、肝和脾等实质器官病变的疾病，主要侵害30日龄内的雏鹅或雏番鸭，该病病程短，致病性强，容易导致宿主动物出现急性、亚急性的高度接触性败血性疾病。小鹅瘟在世界范围内各个地区每年都有不同程度的流行，其流行的形式也因地区的不同而有新的转变，且具有发病率和致死率高、传播快的特点，有文献报道在养鹅业发达的地区小鹅瘟的发病率和致死率可达90％～100％。随着近年来学者们对小鹅瘟病毒流行病学的调查显示，小鹅瘟的易感鹅群的发病日龄有逐渐增大的趋势，而且呈现无规律的散发性流行。目前，鹅细小病毒病仍是危害水禽养殖业最主要的传染病之一，给我国甚至世界水禽养殖业造成了严重的经济损失。

国际上根据鹅细小病毒的形态和基因组复制特点将其划归为细小病毒科、细小病毒属成员。GPV与已知的细小病毒属其他成员亲缘关系较远，目前报道的该病毒只有一个血清型，且与所属的其它成员之间没有交叉血清反应。

在我国小鹅瘟流行的趋势根据饲养方式的不同而略有差别，本病能够经种蛋传播，所以在每年全部更新种鹅的地区，大流行后很少有连续两年以上的大流行，一般间隙期1～5年左右；在每年只更换部分种鹅的地区，其流行规律不呈现周期性，每年都有流行发生，但死亡率较低。小鹅瘟在自然条件下可以感染各个品系的鹅，包括白鹅、雁鹅、灰鹅和狮头鹅，也有在大雁中分离到GPV的报道，除了番鸭外，其它动物均无易感性。一般报道的小鹅瘟在4～20日龄的雏鹅中发病率很高，死亡率可达70％～90％，甚至达到100％[。随着日龄的增大，发病率和死亡率会逐渐下降，而且病程延长，症状减轻。成年鹅一般耐过或不表现临床症状，但可经粪便和分泌物排毒从而污染环境、饲料、饮水以及用具，导致该病通过直接或间接接触而迅速传播，使得雏鹅或雏番鸭经消化道感染，并且迅速波及全群。耐过或呈阴性感染的成年鹅、病愈的雏鹅体内会产生抗体，母鹅通过蛋黄将抗体传给子代，使得雏鹅或雏番鸭获得母源抗体。在养鹅业发达的地区，由于养殖户对于该病的重视，产蛋母鹅往往会接种疫苗，所以雏鹅体内普遍有母源抗体存在。

目前我国大部分地区主要通过疫苗免疫接种的方式来预防小鹅瘟的发生，各种鹅胚化、鸭胚化弱毒疫苗的成功研制，在一定程度上遏制了小鹅瘟的发生，提高了雏鹅的成活率。这对于我国小鹅瘟的防控工作具有重要意义，也大大提高了养殖户的经济效益。然而，我国小鹅瘟的疫苗防控工作虽然已经取得了一定的成绩，但是因母源抗体的干扰，导致疫苗生产受到影响，以及疫苗使用过程中的免疫失败仍时有发生，因此该病仍呈零星爆发，并没有得到完全的控制，依然是威胁我国养鹅业最严重的疾病之一。在雏鹅发生小鹅瘟时，人们通过给鹅群紧急接种小鹅瘟高免血清，使鹅群得到紧急的预防和治疗，但用强毒免疫母鹅获得高免血清的方法产量有限，而且血清效价的均一性不能保证，因此在临床应用中受到一定的限制。

随着单克隆抗体生产技术的出现，使得单克隆抗体的应用成为疾病和肿瘤治疗的热门课题。单克隆抗体因其特异性高、纯度高、均一性好以及来源稳定并可大量生产等优点，已经成为对感染性疾病的研究、诊断和治疗的有力手段。随着单克隆抗体技术在水禽疾病研究中的应用以及不断深入，其在小鹅瘟的防治中发挥的作用和地位也越来越彰显出来。

目前，缺乏一种特异性好的具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种特异性好的具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体。

为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：本发明提供了一种分泌特异性抗小鹅瘟病毒抗体的杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株为GPV-Mab-6D8和GPV-Mab-4E7；保藏名称为杂交瘤细胞株；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2014年8月26日；保藏编号分别为CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578。

本发明的一种用于预防和治疗小鹅瘟的单克隆抗体，所述单克隆抗体由保藏编号CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578的杂交瘤细胞株分泌产生。

本发明制备所述的具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体的方法，其特征在于：利用间接免疫荧光反应检测鹅胚成纤维细胞中的小鹅瘟细胞适应毒，从而筛选得到针对天然小鹅瘟病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株。