[发明专利]酶法制备(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯在审
申请号: | 201410613335.0 | 申请日: | 2014-11-04 |
公开(公告)号: | CN104328148A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 竺伟;陈加利;张文明;吴会 | 申请(专利权)人: | 尚科生物医药(上海)有限公司 |
主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12R1/19 |
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地址: | 201318 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 法制 羟基 己酸 叔丁酯 | ||
1.一种酶法制备(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的方法,其特征在于:将共表达全细胞、(S)-6-氯-5-羟基-3-氧代己酸叔丁酯、辅因子、葡萄糖和缓冲液按一定比例混合后反应得到产物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述共表达全细胞为含羰基还原酶(KRED)与葡萄糖脱氢酶(GDH)的基因工程菌。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述共表达全细胞是由能同时表达羰基还原酶(KRED)与葡萄糖脱氢酶(GDH)重组基因的大肠杆菌或酵母菌通过发酵培养得到,其中优选为大肠杆菌。
4.如权利要求1、2或3所述的方法,其特征在于:利用所述共表达全细胞直接催化反应。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述共表达全细胞的浓度为10~300g/L、所述(S)-6-氯-5-羟基-3-氧代己酸叔丁酯的浓度为10~300g/L、所述辅因子的浓度为0.01~1.0g/L、所述葡萄糖的浓度为10~300g/L和所述缓冲液的浓度为10~100mM/L。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述反应在pH=5~8、温度为20~45℃下进行。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述辅因子为NAD、NADH、NADP和NADPH的任意一种或它们的组合,其中优选为NADP。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液或三乙醇胺缓冲液,其中优选为三乙醇胺缓冲液。
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