[发明专利]一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备及应用

权利要求书

1.一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：

（1）银离子取代的羟基磷灰石标记抗体的制备

将粒径20~60nm的纳米羟基磷灰石和硝酸银以质量比为1 : 1 ~ 3的比例混合，溶于5~10mL水中，震荡10~24小时，离心分离；

取1~2mg获得的银离子取代的纳米羟基磷灰石，溶于5mL磷酸盐缓冲溶液，加入0.05~0.1ml浓度为10 μg/mL 的PSA抗体溶液，孵化震荡5~12小时，离心分离；

将获得的银离子取代的羟基磷灰石标记抗体重新加入5mL磷酸盐缓冲溶液，并加入1mg的牛血清白蛋白，孵化震荡5~12小时，离心分离；

将沉淀重新分散到2~4mL磷酸盐缓冲溶液中，即获得银离子取代的羟基磷灰石标记抗体的储备液；

（2）银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器制备

取5~20μL金纳米溶胶滴加到丝网印刷电极上，晾干；

依次在丝网印刷电极上滴加5~10μL的PSA抗体、牛血清白蛋白、PSA、银离子取代的羟基磷灰石标记抗体溶液，孵化1~4小时，并用磷酸盐缓冲溶液清洗干净，即制得一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器；

所述抗体浓度为10μg/mL，牛血清白蛋白浓度为1%。

2.如权利要求1所述的一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备方法，用于PSA的检测包括以下步骤：

（1）工作曲线的绘制

采用不同浓度的PSA按照权利要求1中所述的方法制备一系列银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器；

将参比电极、对电极和工作电极连接在电化学工作站上，在电解槽中加入50μL的磷酸盐缓冲溶液溶液，再加入5~10μL的10%的盐酸溶液，将银离子取代的羟基磷灰石溶解，释放出银离子；

设定电位范围为-0.2~0.4V，沉积电位为-0.2V，沉积时间为30~300s，通过阳极溶出伏安法检测修饰好的工作电极的电流响应；

根据所得电流响应与PSA浓度的关系，绘制工作曲线；

（2）PSA的检测

采用5~10μL待测血清样品取代步骤（1）中的PSA，其它与步骤（1）相同；

根据所测得的数值，对照PSA的工作曲线，计算出样品中PSA的含量。