[发明专利]一种从猫豆中提取左旋多巴的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域的提取方法，具体说是一种从猫豆中提取左旋多巴的方法。

背景技术

猫豆(Mucuna cochinchine-sis(Lour)Tang et Wang.)，别名：黎豆、龙爪黎豆、虎爪豆、狗爪豆，英文名：velvet bean。豆科黎豆属一年生草质藤本植物。茎圆柱形，蔓长2-10m，多分枝。三出复叶，小叶矩圆状卵形。总状花序，蝶形花冠，近白色或紫色。原产亚洲南部和东部。中国主要分布于华南、西南及浙江、江西、湖南、广西等省区。喜温暖湿润气候，耐旱、耐瘠薄，不耐涝。猫豆是一种耐旱、耐瘦、适应性很强的农作物，根部有很多根瘤菌，可以提高土地肥力，根系比较发达，叶蔓攀高，覆盖面广，有利于保持水土。猫豆全身都是宝，豆壳、豆叶和豆籽都含有丰富的粗脂肪和粗蛋白，是上乘的猪饲料。猫豆的左旋多巴含量高达5.22-9.94％，是生产左旋多巴药的原料。

左旋多巴(L-DOPA，全称3,4-二轻苯丙氨酸)为抗震颤麻痹药，通过血脑屏障进入脑组织发挥作用，适用于原发性震颤麻痹症及非药原性震颤麻痹综合征。

目前从猫豆中提取天然左旋多巴已有一定的历史。如中国专利CN102267919A公开了一种猫豆左旋多巴的制备方法，以猫豆为原料，以酸水溶液为提取溶剂，提取后用水溶性有机溶剂与盐溶液和高分子水溶性聚合物按比例组成双水相体系，溶液中平均浓度达到20-40％的分配平衡，再用与两水相不相溶的萃取剂进行萃取，分别除去杂质，余下部分通过脱色、结晶和干燥得到质量分数为99.9％左旋多巴产品。但该方法步骤多，用时长，制备过程加入大量的无机盐等物质，容易造成产品的重金属等超标，影响了产品的品质。韦国锋、黄祖良、何有成等，比较离子交换树脂法和活性炭吸附法运用于提取猫豆左旋多巴中的效果，发现两种方法的收率可达2-3％，但离子交换树脂法和活性炭吸附法需要时间长，处理原料量低下，产品纯度较低。罗栋源、魏漩、龚琴、吴莎、万端极等，对膜工艺提取猫豆左旋多巴进行研究，提取的左旋多巴纯度达到99.72％，水回用率接近90％，整个工艺过程能耗低、污染少、不使用有毒试剂，实现了清洁生产目标。但所用的膜易受到污染，会影响到产品品质；且膜寿命短，需要定期更换，增加了成本。传统提取工艺多用酸水醇法，左旋多巴收率仅为1.5％左右，此工艺最大的缺点是需要蒸发大量的提取剂，能耗大，收率低，设备投资多，成本高。

综上所述，研究一种简单可行、操作方便的左旋多巴的提取方法具有很好的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种从猫豆中提取左旋多巴的方法，具有工艺简单，适合生产，时间短等优点。

本发明通过以下技术方案实现，具体包括如下步骤：

1)原料处理：将猫豆破碎；

2)高压提取：将处理后的原料，放入高压罐中，加入相同重量的纯净水，加压至4kgf/cm²，使其压力均匀，并保持10-15min，恢复常压，过滤，得到提取液；

3)分离：对猫豆进行双水相萃取，获得萃取上相和萃取下相，双水相萃取所使用的双水相体系由聚乙二醇、氢氧化钠和水构成，聚乙二醇在所述双水相体系中的质量百分比为20-30％，氢氧化钠在所述双水相体系中的质量百分比为1-5％，余量为水，所述聚乙二醇的重均分子量为1000-8000；

4)后续处理：将步骤3)获得的萃取上相，脱盐、静置，析晶，干燥后得到左旋多巴。

本发明所述的脱盐优选采用超滤法或透析法，超滤法采用截留分子量为1000-100000的超滤膜脱盐，透析法采用截留分子量为1000-100000的透析袋脱盐。

所述的静置，析晶，优选静置12-24h、静置温度0-4℃。

本发明得到的左旋多巴，经HPLC检测，含量在98.5％以上。

与现有技术相比，本发明的优点：

1、现有技术在进行左旋多巴的提取时，前处理一般都是以水或乙醇等为溶剂，通过加热提取来将有效成分溶出，而本发明采用高压提取，相比加热提取，经过高压作用，使得猫豆中含有的有机酸、多酚、左旋多巴等成分能充分溶出，利于后续工艺的处理，利于提高活性成分的收率。