[发明专利]一种溶血剂及其应用和白细胞分类计数方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种溶血剂及其应用和白细胞分类计数方法。

背景技术

白细胞亦称白血球，血液细胞成分之一，为无色圆形细胞，比红细胞略大，有细胞核。可分为嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞五种。在机体发生炎症或疾病时，白细胞数往往发生变化，故白细胞分析是医学实验室血液检验中最常采用的检测项目之一。白细胞计数和分类不仅对疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后分析均有重要意义，而且对健康状态的评估也有一定的价值。

白细胞中的嗜碱性粒细胞大小约为10～15um，呈圆形或椭圆形，细胞核与细胞质之比约为1：2～1：3，细胞核分叶状，常被颗粒覆盖，核染色质聚集，无核仁，细胞质含粗大、致密、深紫色或黑色颗粒，在健康人体血液中嗜碱性粒细胞大约占白细胞总数的0.5～1％，嗜碱性粒细胞增多见于慢性粒细胞白血病、何杰金氏病、癌转移、铅铋中毒等。

采用瑞氏试剂对样品染色并进行人工镜检是白细胞五分类计数的“金标准”，但是随着人们对临床检测要求的不断提高，这种耗时、繁琐的标准方法越来越不适应如今的临床检测。随着医学血液学的发展,各种类型的血细胞分析仪配合专用试剂(如溶血剂等)的检测方法在国内得到了广泛的应用,这些全自动的仪器先通过专用试剂处理红细胞(RBC)，然后采用流式技术或电阻抗的计数原理，通过获取白细胞不同细胞器发射出的荧光信息和散射光信息将白细胞分成不同种类。

然而，由于不同类的白细胞的体积可能差别不大，电阻抗原理这种方法只是将白细胞简单分类成淋巴细胞，单核细胞和粒细胞，并不能将嗜碱性粒细胞区分和计数。也有的仪器使用的是光散射原理，比如专利US3740143，使用光学方法可以将淋巴细胞、单核细胞，中性粒细胞，嗜酸性粒细胞区分和计数，但由于嗜碱性粒细胞数量较少，这种方法也不能很好的检测到嗜碱性粒细胞。

现有技术中公开了多种用于白细胞分类的试剂，如CN2011100744709涉及一种用于白细胞五分类计数的溶血剂及用途。所述溶血剂由溶血剂A与溶血剂B组成。溶血剂A由聚氧乙烯型非离子表明活性剂、有机酸、季铵盐阳离子表面活性剂助溶剂、稳定剂和渗透压调节剂组成；溶血剂B由碱性无机盐和渗透压调节剂组成。该溶血剂能够将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞，获得各类白细胞数量。

虽然上述专利记载的技术方案可以有效区分各类白细胞，但是对于仅需要区分嗜碱性粒细胞和其他白细胞来说，其所采用的溶血剂配方较为复杂繁琐，组分较多，而且使用上也需要按照一定的操作步骤来，简便性较差。

US5196346(Didier Lefevre)公开了一种测量白细胞和嗜碱性粒细胞的溶血剂，该溶血剂使用非离子型表面活性剂Brij35和阴离子型表面活性剂，但这种溶血剂对使用温度要求高，溶血速度慢，且原料来源较为繁琐，在使用上仍然不够简便。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于白细胞分类计数的溶血剂，使得该溶血剂的溶血速度快、组分较少，使用方便，能够正确区分嗜碱性粒细胞和其他白细胞。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种溶血剂，包含：

一种或两种以上阳离子表面活性剂、一种或两种以上小分子醇、一种或两种以上缓冲液、一种或两种以上可溶性无机盐，余量为水。

本发明针对目前配方较为复杂的各种溶血剂，选择适宜的组分组合使用，研制出一种新型的可用于准确区分嗜碱性粒细胞和其他白细胞的溶血剂，使用方便并且溶血速度较快，弥补了现有溶血剂的缺陷。

其中，作为优选，所述溶血剂pH值为1.5-4.5，包含浓度为0.1g/L-100g/L的一种或两种以上阳离子表面活性剂、浓度为0.01g/L-50g/L的一种或两种以上小分子醇、浓度为0.001mol/L-1mol/L的一种或两种以上缓冲液、浓度不大于30g/L的一种或两种以上可溶性无机盐。余量为水。

更优选地，所述溶血剂pH值为2-3，包含浓度为1g/L-20g/L的一种或两种以上阳离子表面活性剂、浓度为1g/L-20g/L的一种或两种以上小分子醇、浓度为5mmol/L–200mmol/L的一种或两种以上缓冲液、浓度不大于20g/L的一种或两种以上可溶性无机盐。