[发明专利]检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒及检测方法有效

专利信息
申请号: 201410621338.9 申请日: 2014-11-05
公开(公告)号: CN104388554A 公开(公告)日: 2015-03-04
发明(设计)人: 蔡先全;鱼海琼;岳巧云;柏建山;李蓉;邱德义;赵美转;张磊;萧绮倩 申请(专利权)人: 蔡先全
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 中山市铭洋专利商标事务所(普通合伙) 44286 代理人: 邹常友
地址: 528400 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 检测 金黄色 葡萄球菌 耐药 基因 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒,其特征在于非标记荧光PCR扩增过程中的反应体系由以下组分组成:

2.根据权利要求1所述的一种检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒,其特征在于所述的上游引物包括有:

耐甲氧西林基因mecA上游引物:GCAATCGCTAAAGAACTA

红霉素耐药基因ermc上游引物:TGCCATTGAAATAGACCA

四环素耐药基因tetM上游引物:AAAATCCGCACCCTCTAC

氨基糖苷类药物耐药基因aph3上游引物:AAAATACCGCTGCGTAAA

消毒剂耐药基因qacA/qacB上游引物:GGGTCGTGTTATTAGGCA

万古霉素耐药基因vanA上游引物:TGAATCGGCAAGACAATA

莫匹罗星耐药基因mupA上游引物:TCACGAATACGCACCAAG

耐药性辅助基因femB上游引物:CGAATCGTGGTCCAGTAA

所述的下游引物包括有:

耐甲氧西林基因mecA下游引物:TGGGACCAACATAACCTA

红霉素耐药基因ermc下游引物:AAACCCGTATTCCACGAT

四环素耐药基因tetM下游引物:ATCCGTCACATTCCAACC

氨基糖苷类药物耐药基因aph3下游引物:GGAGTGAAAGAGCCTGATG

消毒剂耐药基因qacA/qacB下游引物:TGGCATTATCTTTGGCTC

万古霉素耐药基因vanA下游引物:TCCTGATGAATACGAAAGA

莫匹罗星耐药基因mupA下游引物:TAGAGCCGCTATCAAACC

耐药性辅助基因femB下游引物:TCCAGCACGCTCTTCAGT。

3.一种检测方法,其特征在于包括以下步骤:

A、根据八种金黄色葡萄球菌耐药基因设计引物对;

B、提取样本DNA后,利用设计的引物对样本DNA进行荧光PCR扩增;

C、应用带HRM模块的荧光定量PCR仪对PCR扩增产物进行HRM分析,确定扩增产物Tm值,从而判定结果;

其中步骤B中进行荧光PCR扩增反应体系由以下组分组成:

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于所述的上游引物包括有:

耐甲氧西林基因mecA上游引物:GCAATCGCTAAAGAACTA

红霉素耐药基因ermc上游引物:TGCCATTGAAATAGACCA

四环素耐药基因tetM上游引物:AAAATCCGCACCCTCTAC

氨基糖苷类药物耐药基因aph3上游引物:AAAATACCGCTGCGTAAA

消毒剂耐药基因qacA/qacB上游引物:GGGTCGTGTTATTAGGCA

万古霉素耐药基因vanA上游引物:TGAATCGGCAAGACAATA

莫匹罗星耐药基因mupA上游引物:TCACGAATACGCACCAAG

耐药性辅助基因femB上游引物:CGAATCGTGGTCCAGTAA

所述的下游引物包括有:

耐甲氧西林基因mecA下游引物:TGGGACCAACATAACCTA

红霉素耐药基因ermc下游引物:AAACCCGTATTCCACGAT

四环素耐药基因tetM下游引物:ATCCGTCACATTCCAACC

氨基糖苷类药物耐药基因aph3下游引物:GGAGTGAAAGAGCCTGATG

消毒剂耐药基因qacA/qacB下游引物:TGGCATTATCTTTGGCTC

万古霉素耐药基因vanA下游引物:TCCTGATGAATACGAAAGA

莫匹罗星耐药基因mupA下游引物:TAGAGCCGCTATCAAACC

耐药性辅助基因femB下游引物:TCCAGCACGCTCTTCAGT。

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