[发明专利]检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒及检测方法有效
申请号: | 201410621338.9 | 申请日: | 2014-11-05 |
公开(公告)号: | CN104388554A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
发明(设计)人: | 蔡先全;鱼海琼;岳巧云;柏建山;李蓉;邱德义;赵美转;张磊;萧绮倩 | 申请(专利权)人: | 蔡先全 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中山市铭洋专利商标事务所(普通合伙) 44286 | 代理人: | 邹常友 |
地址: | 528400 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 金黄色 葡萄球菌 耐药 基因 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒,其特征在于非标记荧光PCR扩增过程中的反应体系由以下组分组成:
2.根据权利要求1所述的一种检测八种金黄色葡萄球菌耐药基因的试剂盒,其特征在于所述的上游引物包括有:
耐甲氧西林基因mecA上游引物:GCAATCGCTAAAGAACTA
红霉素耐药基因ermc上游引物:TGCCATTGAAATAGACCA
四环素耐药基因tetM上游引物:AAAATCCGCACCCTCTAC
氨基糖苷类药物耐药基因aph3上游引物:AAAATACCGCTGCGTAAA
消毒剂耐药基因qacA/qacB上游引物:GGGTCGTGTTATTAGGCA
万古霉素耐药基因vanA上游引物:TGAATCGGCAAGACAATA
莫匹罗星耐药基因mupA上游引物:TCACGAATACGCACCAAG
耐药性辅助基因femB上游引物:CGAATCGTGGTCCAGTAA
所述的下游引物包括有:
耐甲氧西林基因mecA下游引物:TGGGACCAACATAACCTA
红霉素耐药基因ermc下游引物:AAACCCGTATTCCACGAT
四环素耐药基因tetM下游引物:ATCCGTCACATTCCAACC
氨基糖苷类药物耐药基因aph3下游引物:GGAGTGAAAGAGCCTGATG
消毒剂耐药基因qacA/qacB下游引物:TGGCATTATCTTTGGCTC
万古霉素耐药基因vanA下游引物:TCCTGATGAATACGAAAGA
莫匹罗星耐药基因mupA下游引物:TAGAGCCGCTATCAAACC
耐药性辅助基因femB下游引物:TCCAGCACGCTCTTCAGT。
3.一种检测方法,其特征在于包括以下步骤:
A、根据八种金黄色葡萄球菌耐药基因设计引物对;
B、提取样本DNA后,利用设计的引物对样本DNA进行荧光PCR扩增;
C、应用带HRM模块的荧光定量PCR仪对PCR扩增产物进行HRM分析,确定扩增产物Tm值,从而判定结果;
其中步骤B中进行荧光PCR扩增反应体系由以下组分组成:
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于所述的上游引物包括有:
耐甲氧西林基因mecA上游引物:GCAATCGCTAAAGAACTA
红霉素耐药基因ermc上游引物:TGCCATTGAAATAGACCA
四环素耐药基因tetM上游引物:AAAATCCGCACCCTCTAC
氨基糖苷类药物耐药基因aph3上游引物:AAAATACCGCTGCGTAAA
消毒剂耐药基因qacA/qacB上游引物:GGGTCGTGTTATTAGGCA
万古霉素耐药基因vanA上游引物:TGAATCGGCAAGACAATA
莫匹罗星耐药基因mupA上游引物:TCACGAATACGCACCAAG
耐药性辅助基因femB上游引物:CGAATCGTGGTCCAGTAA
所述的下游引物包括有:
耐甲氧西林基因mecA下游引物:TGGGACCAACATAACCTA
红霉素耐药基因ermc下游引物:AAACCCGTATTCCACGAT
四环素耐药基因tetM下游引物:ATCCGTCACATTCCAACC
氨基糖苷类药物耐药基因aph3下游引物:GGAGTGAAAGAGCCTGATG
消毒剂耐药基因qacA/qacB下游引物:TGGCATTATCTTTGGCTC
万古霉素耐药基因vanA下游引物:TCCTGATGAATACGAAAGA
莫匹罗星耐药基因mupA下游引物:TAGAGCCGCTATCAAACC
耐药性辅助基因femB下游引物:TCCAGCACGCTCTTCAGT。
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