[发明专利]梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒，其特征在于设有外包装盒、碱性磷酸酶标记重组抗原瓶、发光底物瓶、梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品瓶、梅毒螺旋体特异性阳性对照品瓶、洗涤液瓶和重组抗原包被微孔板；碱性磷酸酶标记重组抗原瓶、发光底物瓶、梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品瓶、梅毒螺旋体特异性阳性对照品瓶、洗涤液瓶和重组抗原包被微孔板设在外包装盒内；碱性磷酸酶标记重组抗原瓶内装有碱性磷酸酶标记重组抗原、发光底物瓶内装有发光底物、梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品瓶内装有梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品、梅毒螺旋体特异性阳性对照品瓶内装有梅毒螺旋体特异性阳性对照品、洗涤液瓶内装有洗涤液。

2.如权利要求1所述梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备梅毒螺旋体特异性重组抗原：

采用基因克隆技术，PCR扩增编码梅毒螺旋体抗原的DNA，并插入大肠杆菌中使其表达，得梅毒螺旋体特异性抗原TPN17和TPN47；

2)制备重组抗原包被微孔板

将步骤1)中的梅毒螺旋重组抗原TPN17和TPN47用包被缓冲液稀释至20μg/mL，以每孔0.1mL加入微孔板中，4℃包被24h；取出抗原板，风干；用0.01mmol/L pH7.4磷酸盐缓冲液配制的1.0％脱脂奶粉，每孔0.2mL，4℃封闭24h，取出用磷酸盐缓冲液洗涤5次，室温风干、消毒，制备重组抗原包被微孔板，密封备用；

3)重组抗原的碱性磷酸酶标记

碱性磷酸酶经过碘酸钠活化，分别与步骤1)重组抗原分子的-NH2偶联，形成碱性磷酸酶标记重组抗原；

4)发光底物制备

人工合成金刚烷胺类发光底物及其增强剂，均经无菌过滤，制备发光底物工作液；

5)洗涤液制备

洗涤液为溶有Tween-20的磷酸盐缓冲液，其中Tween-20的终浓度为0.01％；

6)对照品

梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品：由非梅毒感染的健康人群血清配制而成；

梅毒螺旋体特异性阳性对照品：梅毒患者的特异性抗体阳性血清配制而成；

7)制备梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒

将碱性磷酸酶标记重组抗原、发光底物、洗涤液、梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品、梅毒螺旋体特异性抗体阳性对照品分别装入瓶内，再将碱性磷酸酶标记重组抗原瓶、发光底物瓶、梅毒螺旋体特异性抗体阴性对照品瓶、梅毒螺旋体特异性阳性对照品瓶、洗涤液瓶和重组抗原包被微孔板装入外包装盒，组成梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒。

3.如权利要求1所述梅毒螺旋体特异性抗体化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于在步骤7)中，所述瓶采用聚乙烯瓶。