[发明专利]一种生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法

说明书

技术领域

本发明属于多糖提取技术领域，具体涉及一种生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法。

背景技术                          

牡丹属双子叶植物纲，虎耳草目芍药科芍药属，有花中之王的美称，可在公园和风景区建立专类园。

SARKER SDW等对牡丹和芍药种子的化学成分和药理活性做了研究，从中分离得到9种芪类成分，其中suffruticosolA，B和C为芍药科所特有的成分，药理活性表明，这9种芪类成分具有抗癌、抗氧化、抗炎等作用。KLM HJH等通过化学成分研究，发现牡丹种子水溶性部分含有较高的单萜苷类，特别是芍药苷含量较高，以及大量的糖类，在中等极性部分芪类化合物含量较高，李子璇等对牡丹种仁和种皮部位分析发现，其含有大量的不饱和脂肪酸，特别是亚油酸含量较高。多糖在机体免疫调节，降血糖、抗衰老方面有较强的活性，张明认为多糖作为活性成分因其含量较少，杂质多，因此提取过程中影响因素复杂，如提取时间，料液比，提取次数，醇沉比例等。

CN103045372B披露了牡丹饼粕的综合利用方法，该方法中包括下述的步骤a. 牡丹饼粕用粉碎机粉碎至40 目，装萃取釜，所述的牡丹饼粕是牡丹籽仁初榨后剩下的残留粕渣；

b. 用食品级CO2，其纯度为99.99%，流量为12L/ 小时，设定萃取压力为20MPa、温

度为25℃，分离条件是：分离器Ⅰ压力10KPa、温度50℃，分离器Ⅱ压力4KPa、温度40℃，萃取时间0.5 小时；

c. 提取完毕，收集萃取物，得到牡丹籽油；

d. 取步骤c 中剩下的残渣脱水处理至其水分含量为20%，得牡丹饼粕；

步骤d 中得到的牡丹粕提取多糖，将粉碎的牡丹饼粕置入多功能提取罐中，加入原料10 倍量的水，在提取罐夹套内通入饱和水蒸汽，蒸汽压力为2—2.5kg，开启电机搅拌，待沸腾后，将蒸汽压力降到1.5—2kg，保持沸腾状态，并关闭搅拌电机，进行常压蒸馏；

收集馏出液，将溜出液通过管道流入粗结晶罐中，开启电机搅拌冷却，粗结晶罐夹

套中的循环盐水温度为-2—-5℃，直至馏出液中无白色浑浊液出现为止，此时收集的馏出

液重量约为饼粕量的5-10 倍；即可得到粗多糖，粗品经糖含量、蛋白含量测定后，加水重新

溶解，加0.5 倍体积的酒精摇匀，静置片刻后，6000r/min 离心15min，除去蛋白杂质；

上清液中再加入酒精，至乙醇体积分数约60%，摇匀后静置，待沉淀后，小心将上清

液倒出，沉淀中加入适量90% 酒精和无水乙醇2 次脱水，过滤后沉淀再用无水乙醇洗2 次，

摊于平皿上，50℃烘干，得到多糖精品。

上述的方法主要是以牡丹饼粕为原料，进一步超临界二氧化碳萃取，提取牡丹籽油，然后再对残渣脱水处理，以得到的牡丹饼粕为原料提取多糖，其提取方法为热水浸提。

    需要针对上述的方法进行改进，设计一种提取率高的方法。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种得率和纯度较高的生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法。

本发明生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法是通过下述的技术方案来实现的：

一种生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法，包括下述的步骤：

（1）原料预处理

牡丹饼粕经烘干至其水分含量为2-4%，再粉碎至80-200目；

（2）酶解

将粉碎后的牡丹饼粕，加水混匀，牡丹饼粕与水的重量比例为1：6-12，并加入脂肪酶，脂肪酶的添加量0.3-0.5％，酶解温度45℃，调pH 5.5，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入纤维素酶，纤维素酶的添加量为0.4-0.6％、酶解温度40℃、pH值5，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶的添加量为0.4-1.0%，酶解温度为45℃，pH值8.2，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105℃下灭酶5-10min；

（3）非水溶性多糖转化

淀粉酶的添加量为1.0-1.2％、酶解温度40℃、pH值5，酶解1.5-2.0h后，100-105℃灭酶5-10min；