[发明专利]一种菌陈中绿原酸的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取方法，特别是一种菌陈中绿原酸的提取方法。

背景技术

菌陈为菊科多年生草木植物滨蒿或菌陈蒿的干燥地上部分。我国的大部分地区均有分布，主产于陕西、山西、安徽等地，春季采收的习称“绵菌陈”，秋季采割的称“菌陈蒿”，绵菌陈是临床常压的中药之一，本品味苦、辛、微寒、胃、肝胆经具清利湿热保肝利胆之功效，可用于治疗湿仓瘙痒等炎症，含有黄酮、绿原酸及挥发性油等多种活性成分。绿原酸作为绵菌陈中一种重要的生物活性成分，是若干植物的植保素，还具有广泛且显著地药理活性，如抗菌、消炎、抗氧化、清除自由基等，是许多中药及茶叶质量控制的指标。

绿原酸的提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法，再利用纸层析、柱层析、萃取高效液相等方法对绿原酸进行纯化，水溶液提取的优点是经济、安全、使用，不足之处是增加了其它水溶性成分如蛋白质、多糖等质量，使过滤、纯化等后续工艺的难度加大，有机溶剂如乙醇溶液提取杂质含量低、提取效率高，且乙醇可以回收利用，利于后续的纯化工作，但工业上提取要防爆等安全措施，对设备成本相对要求较高。

发明内容

本发明针对传统的后续工艺的难度大、杂质含量高等问题，提出了一种菌陈中绿原酸提取方法，该方法有后续工艺难度小、杂质含量低等效果。

为了达成上述目的，采用的具体技术方案是：

(1)将新鲜的菌陈放置于40℃恒温炉中干燥1h，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40-50目；

(2)准确称取10g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80℃水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40℃时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；

(3)向粗提液中加入80％乙醇100mL，置于水浴上加热至80-90℃时回流1h，冷却至30-40℃时用40g的100目的硅藻土过滤；

(4)将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80％乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80％的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；

(5)用150mL的二氯甲烷萃取2-3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；

(6)将洗脱后的溶液于70℃下进行减压浓缩，将浓缩后的液体用紫外分光光度计测定并计算其成本含量。

具体实施方案

(1)将新鲜的菌陈放置于40℃恒温炉中干燥1h，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40-50目；

(2)准确称取10g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80℃水浴中15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40℃时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；

(3)向粗提液中加入80％乙醇100mL，置于水浴上加热至80-90℃时回流1h，冷却至30-40℃时用40g的100目的硅藻土过滤；

(4)将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80％乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80％的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；

(5)用150mL的二氯甲烷萃取2-3次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；

(6)将洗脱后的溶液于70℃下进行减压浓缩，将浓缩后的液体用紫外分光光度计测定并计算其成本含量。

实例1

将新鲜的菌陈放置于40℃恒温炉中干燥1h，用小型粉碎机将其粉碎筛分成40目；准确称取10g的菌陈置于三角瓶中，向内加入80mL的蒸馏水于80℃水浴15min，再向其中加入80mL的冰水，待温度冷却至40℃时，以60rpm的速度震荡提取1.5h后，经四层纱布挤滤后离心得绿原酸的粗提液；向粗提液中加入80％乙醇100mL，置于水浴上加热至80℃时回流1h，冷却至30℃时用40g的100目的硅藻土过滤；将滤液放置到旋转蒸发仪中蒸干，残渣用80％乙醇溶液溶解至25mL棕色容量瓶中，加入80％的乙醇至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液；用150mL的二氯甲烷萃取2次，再经树脂纯化，并用乙醇的混合溶液进行洗脱；将洗脱后的溶液于70℃下进行减压浓缩，得到的即是绿原酸。

实例2