[发明专利]一种克伦特罗检测质控用动物尿液干粉及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，具体涉及一种克伦特罗检测质控用动物尿液干粉及其制备方法与应用。

背景技术

克伦特罗是最主要的一种“瘦肉精”类物质，在国内外已经发生多起食用动物源性食品导致克伦特罗中毒的事件，我国政府明令禁止在动物生产中使用克伦特罗。但是，由于克伦特罗具有提高动物生长速度和瘦肉率的作用，仍有少数不法分子铤而走险，非法制造、销售和使用克伦特罗，导致克伦特罗在动物生产中禁而不绝，造成的食品安全事件屡有发生。由于克伦特罗主要在动物养殖阶段使用，并且大部分以原型药物的形式从尿液中排出。因此，动物养殖环节是各级管理部门和食品企业克伦特罗监测的重点，其方法主要是采用酶联免疫试纸卡或试剂盒对养殖动物的尿液进行克伦特罗筛查检测。但是，酶联免疫试纸卡或试剂盒本身具有假阳性和假阴性的误判风险，易受环境等因素影响导致失效，对操作环境和人员水平有一定要求，加之市售产品质量参差不齐，一般用户缺乏专业的实验室条件进行质量评价，从而难以对此类产品的质量做出合理的判断，导致了检测结果可靠性差。使用阴性和阳性质控样品对检测产品进行验证是提高检测准确度和可靠性的重要手段。然而，由于动物尿液不便于保存、运输和现场操作，质控样品只能现用现配，所以在酶联免疫试纸卡和试剂盒中的应用很少。因此，开发出易于保存、运输和便于现场操作的质控用动物尿液样品对于提高克伦特罗检测产品结果可靠性十分必要。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种制备克伦特罗检测质控用动物尿液干粉的方法。

本发明所提供的制备克伦特罗检测质控用动物尿液干粉的方法，包括下述a)和b)：

所述a)为阴性样品的制备，具体步骤如下：采集新鲜尿液，立即进行离心处理，收集上清液，得到离心净化后的尿液；接着将所述离心净化后的尿液干燥，得到阴性尿液干粉；

所述b)为阳性样品的制备，具体步骤如下：采集新鲜尿液，立即进行离心处理，收集上清液，得到离心净化后的尿液；接着向所述离心净化后的尿液中加入克伦特罗标准品，混匀，得到含克伦特罗标准品的尿液；最后将所述含克伦特罗标准品的尿液干燥，得到阳性尿液干粉。

上述方法步骤a)中，所述新鲜尿液来源于已知来源并确定从未食用过克伦特罗的动物；其中，所述动物具体可为猪、牛、羊等。

所述尿液的采集时间与动物的排尿时间间隔不超过10分钟，以保证尿液的新鲜程度。

所述离心处理的条件为：1500×g离心5～15分钟。

所述干燥为在真空浓缩仪中进行的室温干燥；所述干燥的时间为4-6小时。

所述干燥的具体操作如下：将所述离心净化后的尿液置于样品瓶中，将所述含有尿液的样品瓶置于真空浓缩仪内进行室温干燥，得到尿液干粉，立即对盛有尿液干粉的样品瓶加盖密封，得到所述阴性尿液干粉。

所得阴性尿液干粉用1mL纯水溶解后形成的克伦特罗阴性动物尿液复原液中，克伦特罗的含量小于0.1ng/mL。

当需要制备大量的阴性尿液干粉时，上述方法步骤1)的具体操作如下：将每次排尿后的新鲜尿液收集，立即进行离心处理，收集上清液，随后将所述上清液于2～6℃下暂存不超过24小时；将多次排出的经离心净化后暂存的尿液混合，于-18℃以下的温度下冻存；在所冻存的尿液的总量达到要求后，将所述冻存后的尿液回温至室温，震荡混匀，得到均匀一致的尿液；最后将所述均匀一致的尿液干燥，得到所述阴性尿液干粉。

上述方法步骤b)中，所述新鲜尿液的来源与步骤1)中新鲜尿液的来源相同，同样来源于已知来源并确定从未食用过克伦特罗的动物；所述动物具体可为猪、牛、羊等。

所述尿液的采集时间与动物的排尿时间间隔不超过10分钟，以保证尿液的新鲜程度。

所述离心处理的条件为：1500×g离心5～15分钟。

所述干燥为在真空浓缩仪中进行的室温干燥；所述干燥的时间为4-6小时。

所述干燥的具体操作如下：将所述含克伦特罗标准品的尿液置于样品瓶中，将所述含有尿液的样品瓶置于真空浓缩仪内进行室温干燥，得到尿液干粉，立即对盛有尿液干粉的样品瓶加盖密封，得到所述阳性尿液干粉。

所得阳性尿液干粉用与浓缩前尿液体积相同的纯水溶解后得到的克伦特罗阳性动物尿液复原液中，克伦特罗的含量与配置浓度比值介于80-120％。