[发明专利]一种氢氧化铝佐剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于疫苗制剂领域，具体而言，涉及一种氢氧化铝佐剂的制备方法。

背景技术

铝佐剂作为免疫佐剂已经使用了很长的时间，其安全性与免疫增强作用早已被人们所证实。Glenny和其同事在1926年首先发现将铝盐(KAl(SO₄)₂·12H₂O)与白喉类毒素共沉淀，能显著提高其效价。现在的铝盐佐剂主要有硫酸铝钾、磷酸铝、氢氧化铝。其中氢氧化铝佐剂被应用得最为广泛。

氢氧化铝佐剂为弱晶型的勃姆石(poorly-crystalline boehmite,PCB)，其化学式AlO(OH)，为偏氢氧化铝。X射线衍射显示PCB晶体形态的氢氧化铝佐剂在12.6、27.5、38.2、48.4和64.4°2θ有比较宽的特征峰出现。等电点是描述氢氧化铝佐剂特点的一个参数，不同商品化的氢氧化铝其等电点不一样，的等电点为9.5左右，而Rehydragel LV的等电点为11.6。氢氧化铝佐剂是由许多纤维状的初级粒子聚集成大小1-10μm的次级粒子，这种粒子的大小在发挥佐剂免疫效果时有重要作用，颗粒的大小会影响树突状细胞对抗原的摄取，颗粒越大，摄取效果越差。除此之外，不同于《中国药典》的粗放行规定，《欧洲药典》(7.0版)关于氢氧化铝佐剂质量控制指标中还包括附能力、沉降情况等物理化学性质的参数等。

全球现有2大氢氧化铝佐剂生产厂家(Brenntag Biosector和General Chemical，即商品名为和Rehydragel LV的氢氧化铝佐剂)能够生产符合上述参数的氢氧化铝佐剂，但由于涉及其技术秘密，并未有公开的文献和专利报道其氢氧化铝佐剂的配制方法。因此，国内目前迫切需要一种能够工业化生产国际上认可的商品化氢氧化铝佐剂的方法。

发明内容

本发明涉及一种氢氧化铝佐剂的配制方法，该方法使配制出的氢氧化铝佐剂的晶体形态，粒径大小，等电点，吸附能力等理化性质参数与国际上认可的商品化佐剂一致。

本发明所述的氢氧化铝佐剂的配置方法包括如下步骤：

(1)配制铝盐溶液、碱溶液；

(2)将碱溶液滴加入铝盐溶液中，在滴加过程中保持温度50-70℃，滴加至一定pH值时，通过同时滴加碱性溶液和铝盐溶液维持反应体系在该pH值恒定不变，恒定pH值滴加持续30～60min，随后停止滴加铝盐溶液，继续滴加碱溶液至反应体系pH值相比于恒定滴加时pH值提升0.8～1.7即为反应终点；

(3)将步骤(2)反应产物离心，用0.1-0.5％的NaCl溶液洗涤，随后用0.1-0.5％的NaCl溶液重新溶解；

(4)将洗涤好的产物溶液加热至第一温度60-100℃，加热过程中进行搅拌并滴加0.1-4％的NaOH溶液调节pH值至5.8-7.0并稳定为止，由于在调节pH的过程中会有氢氧化铝的晶体结构的变化，从而导致pH值会一直降低，因此要求滴加到最终pH不要再发生变化(此时即结构基本稳定)为止，在该温度下热处理1-5小时，随后升温至第二温度110～150℃热处理1～43小时；

(5)洗涤：将热处理后的产物进行离心，用含0.1-0.5％的氯化钠溶液洗涤1-3次，并用0.1-0.5％的氯化钠重新溶解；

(6)灭菌与分装：采用湿热灭菌，121℃下灭菌30分钟，然后在无菌环境下保持60～80℃下用50-150微米滤膜进行过滤后分装。

本发明所述的配置方法中，

步骤(1)中铝盐可以是AlCl3或Al2(SO4)3，碱可以是NaOH或氨水，优选AlCl3与NaOH溶液反应，Al2(SO4)3与氨水溶液反应；

所述的铝盐的浓度为0.01-1M，碱溶液的浓度为0.01-1M；

所述的铝盐溶液最优选为铝离子含量0.25mol/L的AlCl3·6H2O溶液；

所述的碱溶液优选为0.265mol/L的NaOH溶液；

步骤(2)所述的一定pH值范围为2.5～4.5，优选为3.0-4.0，恒定pH值滴加完毕后，继续滴加碱溶液至反应体系pH值相比于恒定滴加时pH值提升0.8即为反应终点；

所述的溶液滴加优选通过蠕动泵滴加，反应体系的温度优选为60℃；

步骤(3)所述洗涤为使用0.3％(wt)的NaCl溶液洗涤1～3次，至游离的铝含量小于总铝含量的5％为止，优选的，洗涤至游离的铝含量小于总铝含量的1％为止。