[发明专利]具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针的合成方法及其应用

权利要求书

1.一种具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针，其特征在于，其结构式为:

2.根据权利要求1所述的具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针，其特征在于，其在pH值<1.0呈现红色荧光，pH值1.0-12.0之间没有荧光，pH值>12.0呈现蓝绿色荧光。

3.根据权利要求1所述的具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针的制备方法，其特征在于，其具体制备步骤为:

1)冰浴下将40-50mmol氯氧磷缓慢滴加到1-2mL二甲基甲酰胺中，撤去冰浴，在氮气氛围下室温搅拌20-40分钟，然后滴入4-20mL的2,7-二甲氧基萘的二氯甲烷溶液，其中2,7-二甲氧基萘为4-15mmol，室温下反应10-24h；反应完成后将反应液滴加入冰水混合液中，水解2-10h后用二氯甲烷萃取，然后蒸干溶剂二氯甲烷，最后用甲醇重结晶得到2,7-二甲氧基-1-醛基萘；

2)将2-7mmol三溴化硼在0℃下缓慢滴加入5-20mL的2,7-二甲氧基-1-醛基萘的二氯甲烷溶液中，其中2,7-二甲氧基-1-醛基萘为0.2-7mmol，氮气氛围下室温搅拌5-12h；反应结束后，将反应液滴加入水中，用碳酸氢钠调节pH值到5，用氯仿萃取有机相，然后倒入乙醚得到沉淀，过滤除去沉淀，上清液加入正己烷，过滤收集黄色沉淀，即为羟基官能化的中间体；

3)将1-5mmol 3-甲基-2-丁酮滴入5-15ml羧基苯肼盐酸盐的乙酸溶液中，其中羧基苯肼盐酸盐为1-5mmol，氮气氛围下回流反应10-24h；反应结束后将反应液加入40-70mL水中，用碳酸氢钠饱和溶液将体系pH值调节到5，用二氯甲烷萃取，有机相除去溶剂二氯甲烷后用丙酮洗涤得到黄色固体，即为羧基官能化的吲哚；

4)将步骤3)得到的羧基官能化的吲哚2-4mmol和4-溴甲基苯甲酸2-4mmol溶解在5-15mL乙腈中，氮气氛围下回流反应10-24h后，向反应液中加入乙醚，过滤得到粉色沉淀，即为季胺化的吲哚盐；

5)将步骤2)得到的羟基官能化的中间体0.5-2.5mmol和步骤4)得到的季胺化的吲哚盐0.5-2.5mmol溶解在5-15mL乙醇中，加入0.5-2mL吡啶催化，氮气氛围下回流反应5-10h后，向反应液加入乙醚，生成的沉淀过滤除去，滤液旋蒸浓缩后加入正己烷，得到粉红色沉淀，即为具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针。

4.根据权利要求3所述的方法制备得到的具有极酸/极碱开关响应的螺吡喃小分子荧光探针在生物标记中的应用。