[发明专利]一种九味獐牙菜片的制备方法及其在制备抑制前列腺癌细胞RM-1细胞增殖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种九味獐牙菜片的制备方法及其在制备抑制小鼠前列腺癌细胞RM-1细胞增殖药物中的应用。

背景技术

九味獐牙菜胶囊标准号WS-11182（ZD-1182）-2002，记载于国家中成药标准汇编内科肝胆分册。由獐牙菜53.6g、金腰草17.9g、榜嘎35.7g、木香35.7g、兔耳草35.7g、苦荬菜42.9g、角茴香35.7g、小檗皮28.6g、波棱瓜子14.2g作为原料药制成，具有清热，消炎，止痛的功效。用于胆囊炎，急性黄疸型肝炎。

现有技术中，尚未有九味獐牙菜胶囊在提取制备方面采用CO₂超临界萃取、微波技术和大孔树脂吸附技术提取的报道，而中药直接打粉取的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种九味獐牙菜片的制备方法。

本发明的另一个目的在于提供一种九味獐牙菜片在制备抑制小鼠前列腺癌细胞RM-1 细胞增殖药物中的应用。

本发明的目的是通过如下的方案实现的：

一种九味獐牙菜片的制备方法，由獐牙菜53.6g、金腰草17.9g、榜嘎35.7g、木香35.7g、兔耳草35.7g、苦荬菜42.9g、角茴香35.7g、小檗皮28.6g、波棱瓜子14.2g作为原料药制成，所述的制备方法由下列步骤组成：取木香、角茴香，粉碎成细粉，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-30MPa，温度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生药·min，萃取时间130-170min，得超临界萃取物，备用；萃取后的木香、角茴香残渣与其他七味药材，粉碎，加入2L的60%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600-800W，萃取2次，每次5-10分钟，合并萃取液，浓缩，加到Diaion HP-10大孔吸附树脂柱上，60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，将超临界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.3g。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述CO₂超临界萃取中夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述CO₂超临界萃取中萃取压力为25 MPa。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述CO₂超临界萃取中萃取温度为60℃。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述CO₂超临界萃取中CO₂流量2ml/g生药·min。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述CO₂超临界萃取中萃取时间为150min。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述微波萃取功率为700W。

上述的九味獐牙菜片的制备方法中，所述微波萃取每次萃取时间为8分钟。

上述的九味獐牙菜片在制备抑制小鼠前列腺癌细胞RM-1 细胞增殖药物中的应用。

现有技术中，九味獐牙菜胶囊口服，一次4-5粒，一日2-3次。九味獐牙菜胶囊服药量大。采用本发明方法制备成的九味獐牙菜片每片重0.3g，每次仅需2片，一日服用2-3次。在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。

试验一、不同方法制备的九味獐牙菜片中盐酸小檗碱含量的比较  

l、仪器及试药本发明九味獐牙菜片：按实施例1方法制备，使用300g原料药，经提取制成200片，每片重0.3g。原九味獐牙菜胶囊，按照WS-11182（ZD-1182）-2002标准方法制备，作为对照。Agilent1200高效液相色谱仪； AE240电子分析天平；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所）。

2、方法

照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。 

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至3）（22:78）为流动相；检测波长为347nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备  精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含盐酸小檗碱28μg的溶液，即得。