[发明专利]鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料及其制备方法。

背景技术

骨折愈合是一个复杂的生理过程，包括细胞的迁移、血管的生成和骨痂的改建等，也包括生长因子对细胞增殖、分化的调控、骨诱导、分子信号传导作用等多序列的修复过程。组织工程学的问世为人体组织器官缺损的再造和修复开辟了新的途径，目前将生物活性成分加载至骨组织工程支架材料上以促进骨修复成为研究新型骨修复材料的趋势，能使生物活性因子与纳米材料稳定充分复合，使材料具备了载药和控释功能，延长生物活性成分降解半衰期，提高生物利用度，又可以起到持续促进成骨的功能，获得更好的骨修复效果。

鹿茸为我国传统名贵中药，鹿茸多肽是其中主要活性成分之一，有加速骨组织再生、周围神经组织再生及创面愈合、促进骨折愈合的作用。鹿茸多肽能够通过促进骨、软骨细胞增殖及促进骨痂内胶原的积累和钙盐沉淀而加速骨折愈合，缩短骨折愈合时间，改善骨折部位的生物力学性能，对骨痂内骨胶原的合成和钙盐沉积具有促进作用。

鹿茸在临床上具有悠久的应用历史，但对其蛋白及多肽的化学及理学方面的研究并不深入，没有更好的适应工业化生产的产品，但是目前的研究主要集中在细胞水平，同时作为多肽类物质，虽然其具有生物活性大、生理作用强的特点，但是却具有稳定性差，容易发生水解、氧化、变性等作用导致完全失去作用，同时体内的半衰期短，经脉注射后很快就被清除或者降解。因此，运用现代生物技术从鹿茸中分离出多肽与蛋白并在此基础上开发出具有高活性的梅花鹿茸生物制剂，进而利用生物工程技术将其工业化生产具有深远的意义。

目前还未有将鹿茸多肽用于治疗骨折愈合方面的临床报道。

 

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何克服鹿茸多肽药物不易通过生物屏障，在伤口及创面易被水解酶破坏，以及如何持续、稳定、高效地控制鹿茸多肽药物的释放速度，延长半衰期，实现药物的靶向释放，大幅度提高药物的生物利用度。

为了解决上述问题，本发明提供了一种鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料及其制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1）提取鹿茸多肽；

2）配制胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液；

3）将上述胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液混匀后，加入步骤1）提取的鹿茸多肽，进行真空冷冻干燥； 

4）将步骤3）冻干后的混合物用戊二醛溶液进行交联反应，反应后再次真空冷冻干燥得到厚度为0.8mm~1.2mm的、多孔的鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖复合材料。

优选的，所述交联反应为将步骤3）的混合物加入戊二醛溶液在4℃混合24h。

优选的，所述鹿茸多肽的提取为采用微波提取后，加入95%乙醇4℃沉淀方法提取鹿茸多肽。

优选的，所述戊二醛溶液的浓度为0.25%。

优选的，所述胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液采用浓度为0.05mol/L的乙酸溶液配制，得到的胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液浓度为0.5%。

优选的，步骤3）中胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液采用体积比为9:1的比例混合均匀。

采用上述方法即制得鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料。所述鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料用于骨折愈合治疗。

本发明有益效果为：本发明采用生物活性物质鹿茸多肽与胶原蛋白-壳聚糖复合，选择胶原蛋白作为缓释释放载体，为克服胶原蛋白自身的不足，将其与壳聚糖复合形成改性胶原材料，不仅能够克服多肽类药物不易通过生物屏障，在伤口及创面易被水解酶破坏等问题，而且可以持续、稳定、高效地控制鹿茸多肽药物的释放速度，延长半衰期，实现药物的靶向释放，大幅度提高药物的生物利用度，从而达到修复骨缺损与药物治疗的双重效果，促进鹿茸多肽在骨修复新型材料中的应用。

附图说明

 图1为本发明鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料的电镜扫描示意图。 

 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，下面实施例仅用于说明本发明而并非对本发明的限制。

（1）鹿茸多肽-胶原蛋白-壳聚糖缓释材料的制备

A、鹿茸多肽提取：取新鲜梅花鹿茸，切成小块，4℃蒸馏水冲洗，粉碎，加预冷冰醋酸溶液匀浆。匀浆液用100W微波处理10min，离心，取上清，加入95%乙醇4℃冷沉，离心，取上清液经旋转蒸发浓缩、冻干得鹿茸多肽粗提物。