[发明专利]含N双杂环酰胺类化合物及其作为免疫抑制剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一类含N双杂环酰胺类化合物，相应制备方法，对免疫系统中PI3K受体和mTOR受体抑制活性，以及这类含N双杂环酰胺类化合物在免疫抑制剂中的应用，属于医学免疫学领域。

背景技术

免疫性是指保护机体不受外界侵害的特性。来自体内外不能够被免疫系统识别的物质容易引起机体的自身防御反应——免疫应答。免疫调节失去平衡，应答过程中T细胞和B细胞等免疫细胞过度增殖或是免疫球蛋白过度堆积，往往会造成自身免疫病如类风湿性关节炎、红斑狼疮、皮肤真菌病、膜肾球肾炎、炎性肠病和自身免疫性溶血贫血等，也会造成器官移植中的排斥反应。在这种情况下，人体就非常需要可抑制机体异常免疫反应的免疫抑制剂。

免疫抑制剂是一类具有免疫抑制作用的药物，主要功能为抑制机体异常的免疫反应，应用于自身免疫性疾病和过敏反应及器官移植(如心、肝、肾、肺和骨髓移植等)后排斥反应的治疗。自身免疫性疾病是由于自身免疫应答过强或持续时间过长以至破坏自身正常组织结构并引起的相应临床症状；过敏反应即为机体抗原持续刺激或同一抗原再次刺激后产生的一种以生理功能紊乱和组织损伤为主要表现的病理性免疫反应；临床器官移植手术后，受者免疫系统可识别移植物抗原并产生应答，移植物中免疫细胞也可以识别受者组织抗原并产生免疫应答，此为移植排斥反应。这些症状都是机体“不适当”的免疫应答引起的，而免疫抑制剂在一定程度上能够起到治疗的作用，尤其是在器官移植排斥反应的预防和治疗中起到了关键作用，在临床上得到了广泛的应用。

研究发现PI3K/mTOR信号通路在调节获得性免疫细胞的活化方面起到关键作用。不同类型的PI3K的异二聚体和mTOR，可以精密的控制细胞的存活、增殖，调节着B细胞抗原受体和T细胞抗原受体信号的传递。因此，针对PI3K受体以及mTOR受体开发抑制剂可以有效治疗免疫性疾病。

PI3K是一种胞内磷脂酰肌醇激酶，可以调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动，但特定位点的基因遗传变异会导致PI3K依赖性信号通路过度表达，直接磷酸化mTOR，从而实现P13K/Akt信号通路的负性调节，促进细胞增殖。PI3K抑制剂的缺点是靶向性差、稳定性弱、溶解性不好。

mTOR为哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白，是一种非典型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。可以整合细胞外信号，磷酸化下游靶蛋白核糖体p70S6激酶，影响转录与翻译过程，从而参与调控细胞生长、增值等过程。现有的mTOR抑制剂有：吡咯并喹啉衍生物，色酮衍生物，雷帕霉素及其衍生物。mTOR抑制剂的优点是活性非常强；缺点是靶向性不好。

运用计算机辅助药物设计-基于PI3K/mTOR受体结构进行虚拟筛选的方法，设计合成出一系列双重抑制类化合物，通过细胞活性测试，确证了此类化合物的抑制作用。此类化合物对于研究开发新的免疫抑制剂具有重大意义。

发明内容

本发明的目的是提供了一类新型含N双杂环酰胺类化合物，以及这类化合物的制备方法；本发明还提供所述含N双杂环酰胺类化合物用于抑制免疫细胞，以及用于自身免疫性疾病或移植排斥反应。这类新化合物对免疫系统中PI3K受体和mTOR受体都有明显抑制作用，属于双重抑制剂。

本发明提供含N双杂环酰胺类化合物，其通式如I式：

式中，X为硫原子或者氧原子；R独立选自下列之一：氢、C1-C3的烷基、C2-C3烯基、C2-C3炔基、C1或C3的烷氧基、C1-C3的醇基、C1-C3的烷硫基、C1-C3的烷胺基、C1-C3的羧酸基、氯元素、溴元素、碘元素、氰基、硝基和甲砜基。

进一步，所述含N双杂环酰胺类化合物的制备方法，包含如下步骤：

双氯西林酰氯与2-氨基苯并唑类衍生物在碱性条件，无水溶剂中反应直接获得最终产物，具体步骤包括：

(1)在惰性气体保护下，干燥的2-氨基苯并唑类衍生物溶于5-6ml/mmol无水溶剂中，以无水三乙胺做碱，0～50℃低温下滴加双氯西林酰氯的二氯甲烷溶液，溶剂以能全溶酰氯为宜；其中，2-氨基苯并唑类衍生物和双氯西林酰氯物质量的摩尔比为1:1.2；

(2)滴加完成后，继续升温反应，反应温度范围40-80℃，反应时间为24-36h。

用于本发明的原料双氯西林酰氯即3-(2,6-二氯苯基)-5-甲基-4-异恶唑甲酰氯为抗生素双氯西林钠的中间体，可直接从试剂公司购买得到(百灵威、上海国药等)。

用于本发明的另一原料2-氨基苯并唑类衍生物也是从商业途径购买得到(Adamas、Aldrich、百灵威等)。