[发明专利]一种预处理方法及果胶的检测方法有效
申请号: | 201410640726.1 | 申请日: | 2014-11-13 |
公开(公告)号: | CN104316382B | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
发明(设计)人: | 韩梅;郭本恒;董文琪;徐致远;刘振民;杨博崴 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N21/31 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所31283 | 代理人: | 朱水平,王卫彬 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 预处理 方法 果胶 检测 | ||
1.一种果胶的预处理方法,其包括以下步骤:
(1)将待测果胶样品在碱性溶液中进行蛋白质沉淀,分离得滤液;
所述的待测果胶样品为包含果胶的液态奶制品;所述的碱性溶液与所述的待测果胶样品的体积比为1:5-1:15;
(2)向步骤(1)所得的滤液中加入乙醇的浓度至50%体积分数以上,进行沉淀处理,分离得沉淀;
(3)将步骤(2)所得的沉淀溶于水得溶液A,加入乙醇的浓度至50%体积分数以上,进行二次沉淀处理,分离得沉淀;
(4)将步骤(3)所得的沉淀溶于水,得溶液。
2.如权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的碱性溶液为碳酸钠溶液,碳酸氢钠溶液,氢氧化钾溶液,碳酸钾溶液,碳酸氢钾溶液和氢氧化钠溶液中的一种或几种;所述的碱性溶液的浓度为0.5-1mol/L;
步骤(1)中,所述的分离为离心,所述的离心的转速为5000-10000r/min,时间为5-10分钟。
3.如权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的加入乙醇的浓度至50%体积分数以上是通过加入95%体积分数的乙醇溶液实现的,所述的95%体积分数的乙醇溶液与所述的滤液的体积比为1:1.8-1:4;
步骤(2)中,所述的分离为离心,所述的离心的转速为5000-10000r/min,时间为5-10分钟。
4.如权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的加入乙醇的浓度至50%体积分数以上是通过加入95%体积分数的乙醇溶液实现的;
步骤(3)中,所述的分离为离心;
其中,第一次沉淀过程中,所述溶液A与所述的95%体积分数的乙醇溶液的体积比为1:1-1:4;其中,所述离心转速为5000-10000r/min,时间为5-10分钟;
第二次沉淀过程中,所述溶液A与所述的95%体积分数的乙醇溶液的体积比为1:2-1:4;其中,所述离心转速为5000-10000r/min,时间为5-10min。
5.如权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤(4)中,所述的水的用量为步骤(1)中所述的待测果胶样品的体积的2-20倍。
6.一种果胶的检测方法,所述的检测方法包括以下步骤:将如权利要求1-5任一项所述的预处理方法得到的溶液,与四硼酸钠-硫酸溶液混合保温后,水浴冷却,与间羟基联苯氢氧化钠溶液反应后,525nm处测定吸光度,经标准曲线法测定,即可;
其中,所述的吸光度落入0.3-0.8范围内时,经标准曲线法测定,即可;若所述的吸光度不在所述的范围内,调节所述的预处理方法中步骤(4)中水的用量,重复实验,使所述的吸光度值落入所述的范围内,再经标准曲线法测定,即可。
7.如权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述的四硼酸钠-硫酸溶液为每100mL浓硫酸中溶解有0.478g四硼酸钠;
所述保温的温度为95℃,所述保温的时间为10分钟;
所述的间羟基联苯氢氧化钠溶液中,间羟基联苯的浓度为1.5g/L,氢氧化钠的浓度为5g/L;
所述的间羟基联苯氢氧化钠溶液为将间羟基联苯溶液溶于氢氧化钠溶液中所形成的溶液;
所述反应的时间为15-20分钟。
8.如权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述的标准曲线法测定的方法包括以下步骤:用标准品配制标准溶液,将标准溶液与所述四硼酸钠-硫酸溶液混合保温后,水浴冷却,与所述间羟基联苯氢氧化钠溶液反应后,525nm处测定吸光度,用吸光度对标准工作液中样品的浓度绘制标准曲线,再在相同的测量条件下测量待测果胶样品的吸光度,根据待测果胶样品的吸光度和标准曲线计算待测果胶样品的浓度,并计算其含量。
9.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述的标准曲线法测定的方法包括以下步骤:将半乳糖醛酸配置六份浓度为C1-C6的标准溶液,取相同体积的所述标准溶液分别与四硼酸钠-硫酸溶液混合保温后,水浴冷却,与间羟基联苯氢氧化钠溶液反应后,525nm处测定吸光度,记作A1-A6;根据C1-C6和A1-A6绘制标准曲线,再在相同的测量条件下,测量待测果胶样品的吸光度,根据待测果胶样品的吸光度和标准曲线计算待测果胶样品的半乳糖醛酸浓度,并计算果胶的含量。
10.如权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述的C1-C6的标准溶液的浓度按照阶梯变化。
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