[发明专利]一种靶向PRC2抗肿瘤药物的筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗PRC2依赖性肿瘤药物的筛选方法，所述方法以EED-EZH2相互作用为靶点，通过初筛和复筛，筛选出对EED-EZH2互作有拮抗并能使PRC2复合物组分有降解作用的小分子化合物，该小分子化合物可抑制PRC2复合物活性，降解EZH2，对PRC2依赖性的肿瘤细胞有杀伤作用，可用作抗肿瘤药物。

发明背景

癌症由多种因素引起，在世界范围内，它是第一致死因素。2008年统计的数据显示，大概有七百六十万人死于癌症(占所有死亡人数的13％)。急需新的，更有效的癌症疗法来改善这种状况。长期以来，表观遗传和基因突变被认为是癌症发生过程的两种不同机制。通过基因途径致癌相对比较直接：抑癌基因的突变和/或致癌基因引起的功能获得型突变或功能丧失型突变，及异常表达。通过表观遗传途径致癌相对来说没那么简单。它取决于染色质结构包括DNA甲基化，组蛋白变体和修饰，核小体重塑和一些小的非编码调节RNAs(Sharma et al.,2010)。在癌症的发生和发展中，表观基因组经历了很多改变，包括基因组范围DNA去甲基化(超甲基化)，CpG岛启动子甲基化程度增高，核小体空间结构改变及修饰。

进年来，对表观遗传失调在癌症中的作用的认识有所增强。由此，也给靶向性癌症疗法带来了新的机遇。表观遗传学主要是研究基因DNA序列不变的转录的可遗传变化。该领域的研究，也让我们发现了些选择性激活或抑制靶基因的药物。所以，表观遗传学也成为了一门发展很迅速的学科。虽然，我们对表观遗传学的认识还相对比较肤浅。但是，近来，我们也发现一些表观遗传调控因子，包括DNA甲基化，组蛋白修饰，染色质重塑和基因转录，在癌症的引起和发展中所起的作用。大量研究表明，异常的翻译后调控-组蛋白修饰，在很多疾病的发生和发展中有着重要作用。

科学家和药学界近来开发高效、特异的染色质相关蛋白抑制剂取得很大进步。而这些抑制剂主要靶向：组蛋白甲基转移酶、组蛋白去甲基酶、乙酰赖氨酸结合域。目前，大量的研究集中在靶向组蛋白甲基转移酶。

在癌症领域，在一些不同的肿瘤类型中发现的一些组蛋白甲基转移酶基因改变无疑引起了很多关注，也支撑了疾病中广泛被认为由基因驱动的表观遗传的失调的重要性。一些例子(像后面要讨论的甲基转移酶EZH2)，它的催化结构域，SET结构域的杂合子点突变导致相对野生型的功能获得性突变。使其更倾向于超甲基化，并且沉默抑癌基因和/或特异的分化相关基因。同样的，在其它肿瘤中(比方说，多发性骨髓瘤中NSD2的高表达)，染色体移位导致甲基转移酶的高表达，也导致异常的转录和扩增。相反地，由组蛋白甲基转移酶DOT1L引起的赖氨酸甲基化却使得白血病生成所需的多种基因持续的表达。因此，对于像EZH2或DOT1L的小分子抑制剂应该能减少或消除组蛋白甲基转移酶对特异位点赖氨酸的甲基化，并且逆转它的致癌性。现今，研究的比较多的抑制剂主要是针对EZH2。

EZH2(Enhancer of zeste homolog 2)是一种组蛋白甲基转移酶，它催化甲基从辅因子S腺苷甲硫氨酸转移到组蛋白H3的27位赖氨酸上，使得组蛋白H3的27位赖氨酸三甲基化。一些研究表明在一些实体瘤中，包括前列腺癌、乳腺癌、肾癌和肺癌。EZH2水平会升高并且使其靶基因沉默，从而导致预后差。