[发明专利]一种黄花贝母不定芽诱导增殖方法

权利要求书

1.一种黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

将黄花贝母生长期鳞茎消毒后切割成小块，将其接种于诱导培养基中诱导形成带有不定芽和芽点的膨大的外植体后接种于增殖培养基中增殖获得黄花贝母组培苗；

其中，所述诱导培养基为：以MS培养基为基本培养基，含有6-BA和NAA。

2.根据权利要求1所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述诱导的步骤包括：

1)利用诱导培养基在培养温度为19-21℃、光照强度为1450-1550lx、光照时间为11-13h/d的条件下诱导培养30-50天；

2)更换新鲜的诱导培养基在3-5℃下处理7-10天后置于温度为19-21℃、光照强度为2000-2500lx、光照时间为11-13h/d的环境条件下培养25-40天，获得带有不定芽和芽点的膨大的外植体；

所述增殖培养的步骤包括：将上述外植体接种在增殖培养基中，培养条件与步骤1)相同，培养30-50天。

3.根据权利要求1或2所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述诱导培养基为：以MS培养基为基本培养基，含有浓度为0.5-2.0mg/L的6-BA，浓度为0.2-2.0mg/L的NAA。

4.根据权利要求3所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述增殖培养基为：以MS培养基为基本培养基，含有浓度为0.2-1.0mg/L的6-BA，浓度为0.2-1.0mg/L的NAA，浓度为0.1-1.0mg/L的2,4-D。

5.根据权利要求1、2或4所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述诱导培养基还含有浓度为30-50g/L的蔗糖，浓度为6.5-7.0g/L的琼脂。

6.根据权利要求5所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述诱导培养基和增殖培养基的pH为5.8-6.0。

7.根据权利要求1、2或6所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，所述消毒的步骤包括：

将清洗干净的鳞茎在75％的酒精中表面消毒50-70s后用无菌水清洗2-3次，再将鳞茎在0.1％的升汞溶液中浸泡8-12min后用2％的次氯酸钠水溶液浸泡12-16min。

8.根据权利要求7所述的黄花贝母不定芽诱导增殖方法，其特征在于，在诱导培养基中培养结束后诱导获得的不定芽的数目为4-7个。