[发明专利]一种苹果树苗组织培养繁育方法

权利要求书

1.一种苹果树苗组织培养繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体选择

在春季温度达到15℃以上，挑选种性优良，树体健康，无病虫害，生长健 壮发育饱满的嫩枝；

(2)外植体脱毒

将所选的嫩枝，用清水冲洗干净，在无菌实验室内用75％酒精的酒精消毒 30s，再用0.1％的升汞灭菌5-10分钟，用无菌水冲洗3次，滤纸吸干水分后备 用；

(3)增值培养

将嫩枝切成1.5-2cm的带腋芽的小段，接到培养基上培养，愈伤组织诱导培 养基为MS,长出芽尖2cm时，接种到培养基中增值培养；若所选的外植体为茎 尖和叶芽时不用这一步骤，但消毒直接接种到培养基中增值培养；置于25-30℃ 恒温和1500-3000勒克斯(lx)光照强度，每日光照16小时的条件下培养；培养基 使用MS培养基，加入生长素NAA0.05mg/L和细胞分离素BA0.5mg/L.分化芽的 数目明显增大；

(4)生根培养

当在三角瓶中增值培养到35-45天后，观察增值培养苗木的生长情况，将生 长健壮的苗木接种到生根培养中生根培养40-50天，都苗木长至8-10cm，根大 于5cm时，即可移栽；采用含盐低的培养基；置于25-30℃恒温，光照强度一般 要求在2000勒克斯(lx)以上；培养基为：MS+0.34mg/LIBA+0.5mg/LNAA；

(5)移栽

选择根生长好的幼苗，置于温室大棚中放置1-2天后，去掉三角瓶塞，放置5-10 天，看到瓶中苗尖生长到瓶口时，即可移栽到苗圃里；温室温度在15-25℃，湿 度保持在在82-90％；用镊子从瓶中轻轻取出，洗掉附着于根部的培养基，摘去下 部叶片，用600倍多菌灵蘸根，栽入基质为河沙或疏松肥沃的沙质壤土的育苗营 养钵中，每个营养钵中栽入4个小苗，得到幼苗。

2.根据权利要求1所述一种苹果树苗组织培养繁育方法，其特征在于，移栽的 苗床基质为：土:锯末:腐熟有机肥＝0.5：1：0.5。