[发明专利]乳铁蛋白在疼痛治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了乳铁蛋白在临床疼痛治疗中的一种方法，属于生物医药领域。 

背景技术

疼痛(pain)，是一种复杂的生理心理活动，通常由导致组织损伤的伤害性刺激引起，是临床上最常见的症状之一。痛觉可作为机体受到伤害的一种警告，引起机体一系列防御性保护反应；但另一方面，疼痛作为报警也有其局限性(如癌症等出现疼痛时，已为时太晚)，而某些长期的剧烈疼痛，对机体已成为一种难以忍受的折磨。 

乳铁蛋白(lactoferrin，LF)是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、抗病毒感染作用，能调节体内铁的平衡；调节骨髓细胞的生成，促进细胞的生长；调节机体免疫功能，增强机体抗病能力；抑制人体肿瘤细胞的作用；能同多种抗生素及抗真菌制剂协同作用，更加有效地治疗疾病。乳铁蛋白在乳汁中是一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，在中性粒细胞颗粒中属于具有杀菌活性的单体糖蛋白。在人体内乳铁蛋白具有强大的生物学功能，目前被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。 

发明内容：

本发明公开了乳铁蛋白在临床疼痛治疗中的一种方法，属于生物医药领域。用于治疗由于各种原因引起的疼痛。 

本发明通过以下实验证明乳铁蛋白在临床由于各种原因引起的疼痛的一种治疗方法：通过对雄性SD大鼠80只，随机分为生理盐水组(NS组)和福尔马林组(F组)；实验组分为乳铁蛋白1μg-福尔马林组(F-R1组)、乳铁蛋白lOμg-福尔马林组(F-R10组)和乳铁蛋白100μg-福尔马林组(F-R100组)。五组鞘内分别给予生理盐水(NS)20μl，NS 20μl，乳铁蛋白lμg，乳铁蛋白10μg，乳铁蛋白100μg；10min后，除NS组大鼠足底注射NS 100μl外，其余各组均给予5％福尔马林100μl。经以上处理后，将8只动物在福尔马林处理后30min取脊髓观察NOS的表达，另8只动物在福尔马林处理后0～l h观察行为学。结果F组的缩腿舔爪的时间和脊髓NOS表达显著长于和强于NS组；预先给予乳铁蛋白能抑制以上的作用，且呈剂量依赖性。实验证明乳铁蛋白明显抑制福尔马林致痛大鼠痛行为及一氧化氮合酶(NOS)表达，具有一定的抗伤害作用。 

具体实施方式

下面的实例将具体说明本发明的操作方法，但不能作为对本发明的限定。 

研究对象选取鞘内置管成功的体重250—300g雄性SD大鼠80只，随机分为生理盐水组(NS组)和福尔马林组(F组)，实验组分为乳铁蛋白1μg-福尔马林组(F-R1组)、乳铁蛋白10μg-福尔马林组(F—RIO组)和乳铁蛋白100μg-福尔马林组(F-R100组)。五组鞘内分别给予NS 20μ1，NS 20μl，乳铁蛋白1μg，乳铁蛋白10μg，乳铁蛋白100μg；10min后，除NS组大鼠足底注射NS 100μl外，其余各组均给予5％ 福尔马林100μ1。鞘内置管大鼠麻醉后，在枕骨大孔上方纵向切开约1.5—2.0cm的切口，钝性分离皮下组织和颈部肌肉，暴露出寰枕膜，将已经消毒、一端封闭的充满生理盐水的导管向尾端插入7.0—7.5cm，至脊髓腰骶段，然后固定导管并逐层缝合伤口。大鼠清醒24h后观察其活动情况，剔除出现运动功能障碍的大鼠。用2％利多卡因经导管注射来判断导管的位置，如注射后30秒内大鼠出现双后肢麻痹现象说明导管位置正确。术后常规使用抗生素，分笼单独饲养，室温维持20℃一25℃，自然照明，自由饮水和摄食，5天后即可用于实验。 

1行为学反应：采用缩腿及舔爪时间之和作为行为学反应指标，在大鼠足底部注射5％福尔马林后立即用跑表记录大鼠1h内每5min的缩腿舔爪的时间。在大鼠足底注射福尔马林后，其注射足缩腿舔爪反应表现明显有2期，第1期注射后立即开始，持续5min，经过约10min的问歇期，开始第2期，持续约40min，非注射足活动自如，无缩腿舔爪反应。各组第1、2期行为学的比较结果见表1，第1、2期均无缩腿舔爪反应，F组的缩腿舔爪时间显著长于NS组；在第l期内，F-Rl组、F-R10组、F—R100组与F组无显著性差异；而在第2期内F-Rl组、F-R10组、F-R100组的缩腿舔爪时间显著低于F组，且其降低呈剂量依赖性。本实验通过行为观察，发现乳铁蛋白可以显著抑制疼痛的Ⅱ时相反应，说明乳铁蛋向影响了脊髓神经元放电，参与脊髓水平的调制过程，引起抗伤害性效应。且其抗伤害性和抑制NOS的表达呈剂量依赖性。