[发明专利]一种短小芽孢杆菌活菌制剂及其固体发酵方法和应用在审
申请号: | 201410652130.3 | 申请日: | 2014-11-17 |
公开(公告)号: | CN104371957A | 公开(公告)日: | 2015-02-25 |
发明(设计)人: | 王娇;李慧芬;梁晶晶 | 申请(专利权)人: | 青岛根源生物技术集团有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/02;A01P1/00;C12R1/07 |
代理公司: | 青岛致嘉知识产权代理事务所 37236 | 代理人: | 王晓晓 |
地址: | 266736 山东省青岛市平度市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 短小 芽孢 杆菌 制剂 及其 固体 发酵 方法 应用 | ||
1.一种短小芽孢杆菌活菌制剂的固体发酵方法,其特征在于它包括以下步骤:
(1)选用短小芽孢杆菌,将其活化;
(2)将短小芽孢杆菌接种于种子液体培养基中培养12~14h,待短小芽孢杆菌还未形成芽孢状态,得固体发酵种子液;
(3)将步骤(2)的固体发酵种子液接种于灭菌的固体培养基中,搅拌均匀;将发酵物料平摊于37℃下发酵培养20~24h,镜检芽孢率>90%;
(4)将步骤(3)得到的发酵产物直接90℃以下干燥,粉碎过80目筛,包装成品。
2.根据权利要求1所述的短小芽孢杆菌的固体发酵方法,其特征在于:所述短小芽孢杆菌选用短小芽孢杆菌S3,其保藏号为CGMCC No.9161。
3.根据权利要求2所述的短小芽孢杆菌的固体发酵方法,其特征在于:所述种子液体培养基为酶解的豆粕30g/L、玉米面10g/L、葡萄糖50g/L、NaCl 5g/L、余量为水,种子液体培养基的pH为7.0~7.2;所述酶解的豆粕是将豆粕采用中性蛋白酶40℃酶解1h制得,中性蛋白酶的添加量为1000U/g。
4.根据权利要求3所述的短小芽孢杆菌的固体发酵方法,其特征在于:所述步骤(2)中接种量为占培养基体积比的2%,37℃,180rpm培养14h。
5.根据权利要求2所述的短小芽孢杆菌的固体发酵方法,其特征在于:所述固体培养基以质量比为2:2:1的甘蔗渣、粗麸皮、酶解的豆粕为基础料,并添加占总固体培养基的重量比为2%的柠檬酸钠,料水比为1:1,搅拌均匀,调pH 6.5;所述酶解的豆粕是将豆粕采用中性蛋白酶40℃酶解1h制得,中性蛋白酶的添加量为1000U/g。
6.根据权利要求5所述的短小芽孢杆菌的固体发酵方法,其特征在于:所述步骤(3)中种子液接种于固体培养基的接种量为按照体积比10%,搅拌均匀,37℃培养20~24h。
7.根据权利要求1-6任一项所述固体发酵方法制得的短小芽孢杆菌活菌制剂。
8.根据权利要求7所述的短小芽孢杆菌活菌制剂,其特征在于:所述短小芽孢杆菌活菌制剂中的活菌含量为1×1011CFU/g~1.5×1011 CFU/g。
9.根据权利要求7所述的短小芽孢杆菌活菌制剂在制备抑制副溶血弧菌的抑菌剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的短小芽孢杆菌活菌制剂在制备抑制副溶血弧菌的抑菌剂中的应用,其特征在于短小芽孢杆菌固体发酵液用来抑制溶血弧菌时的短小芽孢杆菌活菌含量不低于1×109CFU/g。
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