[发明专利]基于中药药渣生产漆酶酶液及粉状漆酶的方法

权利要求书

1.一种基于中药药渣生产漆酶酶液的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

⑴、PDA固体培养基的准备：以质量体积浓度计，马铃薯汁20％，葡萄糖2％，琼脂2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄·7H₂O 0.15％，在121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；

⑵、种子培养基的准备：以质量体积浓度计，马铃薯汁20％，葡萄糖2％，酒石酸铵0.2％，自然pH值，在121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；

⑶、发酵产酶种子液的制备：取斜面菌种一环在PDA固体培养基上点接菌丝，30℃培养7天，切取3块直径大小为6mm左右的菌落接入装有50mL种子培养基的250mL规格的三角瓶中，加入玻璃珠10粒，置于摇床，转速控制在200rpm，温度30℃，恒温培养2-4天，得到发酵产酶种子液；所述的斜面菌种为白腐真菌菌株；

⑷、发酵产酶培养基的制备：以质量百分含量计，中药药渣30-40％，豆粕10％，麦麸10％，水量40-50％，CaCl₂0.5％，KH₂PO₄0.5％，MgSO₄·7H₂O0.2％，自然pH值，在1.01MPa，121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；所述的中药药渣为大黄药渣、虎杖药渣或者两者任意配比的组合药渣；

⑸、发酵产酶：接种量6-10％，温度24-30℃，自然湿度，恒温发酵6-9天，得到发酵后的培养物；

⑹、漆酶酶液提取：向发酵后的培养物中加入其重量2-6倍的水，在25-40℃下浸提4-6小时后经过离心、过滤，即得到漆酶酶液。

2.根据权利要求1所述的基于中药药渣生产漆酶的方法，其特征在于：所述的中药药渣含水量在30％-40％。

3.根据权利要求1所述的基于中药药渣生产漆酶的方法，其特征在于：所述的马铃薯汁的制备为取马铃薯，切成小片或小块，加水煮20-30min，用4-6层纱布过，取滤液即得到马铃薯汁。

4.一种基于中药药渣生产粉状漆酶的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

⑴、PDA固体培养基的准备：以质量体积浓度计，马铃薯汁20％，葡萄糖2％，琼脂2％，KH₂PO₄0.3％，MgSO₄·7H₂O 0.15％，在121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；

⑵、种子培养基的准备：以质量体积浓度计，马铃薯汁20％，葡萄糖2％，酒石酸铵0.2％，自然pH值，在121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；

⑶、发酵产酶种子液的制备：取斜面菌种一环在PDA固体培养基上点接 菌丝，30℃培养7天，切取3块直径大小为6mm左右的菌落接入装有50mL种子培养基的250mL规格的三角瓶中，加入玻璃珠10粒，置于摇床，转速控制在200rpm，温度30℃，恒温培养2-4天，得到发酵产酶种子液；所述的斜面菌种为白腐真菌菌株；

⑷、发酵产酶培养基的制备：以质量百分含量计，中药药渣30-40％，豆粕10％，麦麸10％，水量40-50％，CaCl₂0.5％，KH₂PO₄0.5％，MgSO₄·7H₂O0.2％，自然pH值，在1.01MPa，121℃高压蒸汽灭菌20min后制备完成；所述的中药药渣为大黄药渣、虎杖药渣或者两者任意配比的组合药渣；

⑸、发酵产酶：接种量6-10％，温度24-30℃，自然湿度，恒温发酵6-9天，得到发酵后的培养物；

⑹、漆酶酶液提取：向发酵后的培养物中加入其重量2-6倍的水，在25-40℃下浸提4-6小时后经过离心、过滤，即得到漆酶酶液；

⑺、上述漆酶酶液经过喷雾干燥后即得粉状漆酶。

5.根据权利要求4所述的基于中药药渣生产漆酶的方法，其特征在于：所述的中药药渣含水量在30％-40％。

6.根据权利要求4所述的基于中药药渣生产漆酶的方法，其特征在于：所述的马铃薯汁的制备为取马铃薯，切成小片或小块，加水煮20-30min，用4-6层纱布过，取滤液即得到马铃薯汁。