[发明专利]一种从云芝中制备α‑半乳糖苷酶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备α-半乳糖苷酶的方法；特别涉及一种从云芝中制备α-半乳糖苷酶的方法，属于生物技术领域。

背景技术

α-半乳糖苷酶(α-Galactosidase，α-Gal)是一类催化水解含有α-半乳糖苷键的酶类。它能水解非还原性末端以α-1,6键结合的半乳糖苷化合物，因此它能水解水苏糖，蜜二糖，棉籽糖等低聚糖，也能水解含有α-半乳糖苷键的杂多糖，如半乳甘露聚糖和半乳糖醛酸聚糖。α-半乳糖苷酶来源于微生物、植物和动物，以单体、二聚体、三聚体或四聚体形式存在；尤以微生物的产量高。α-半乳糖苷酶在食品、医药、饲料工业等领域得到了广泛应用。

α-半乳糖苷酶在食品加工中的应用：

(一)豆类因其脂肪含量低、蛋白质含量丰富、含有人体必须的膳食纤维、多种微量元素和植物色素而被许多国家人民作为传统食品。大豆含有的异黄酮对癌症和骨质疏松症有较好的疗效，而且，豆奶因其价格比牛奶低廉而作为发展中国家乳糖不耐症婴儿和儿童的营养补充物质，美中不足的是大豆中含有许多抗营养因子，其中之一就是棉子糖家族的低聚糖，它们不能被人消化吸收，这些抗营养因子被肠道细菌发酵，引起嗝气、肠鸣、腹胀、腹痛等症状。α-半乳糖苷酶可用于豆奶的发酵，水解豆奶中易使胃部胀气的棉子糖和水苏糖，从而获得低α-半乳糖基寡聚糖含量的豆奶制品，有利于人体消化。如采用蔗糖酶和α-半乳糖苷酶处理这些α-半乳糖苷低聚糖，将其水解成半乳糖、葡萄糖、果糖等，减轻这些低聚糖在大肠中因发酵而引起的肠道不适。Viana,P A报导，从酵母菌中提取的胞外α-半乳糖苷酶与豆奶在60℃，100r/min的条件下混合反应4个小时后，棉子糖和水苏糖被完全降解，而蔗糖的含量升高至6.53％。王璇琳通过建立小鼠胀气模型来研究α-半乳糖苷酶对消除大豆低聚糖引起的小鼠胀气，对照组分别灌胃一定剂量的棉子糖和水苏糖，而实验组将基因重组的α-半乳糖苷酶分别与棉子糖水苏糖混合即刻灌胃，2h测量胀肠容积，与对照相比，胀肠容积有效降低，说明α-半乳糖苷酶在胃中酸性环境能发挥对棉子糖和水苏糖的酶解作用，消除棉子糖和水苏糖引起的胀气现象。

(二)在甜菜加工工业中，甜菜中由于棉子糖的存在，致使糖蜜黏度增加，影响蔗糖的结晶析出，造成糖产量降低，产生大量的废糖蜜，既降低了产糖率又影响蔗糖质量；棉子糖本身又不能被利用，因此棉子糖是甜菜制糖工业中的一种有害物质，为提高蔗糖的收率曾采用过化学提取法，但均因工艺复杂，成本高，难于在工业中应用。应用α-半乳糖苷酶处理废糖蜜，可将阻碍蔗糖结晶析出的棉子糖去除，还可使一部分棉子糖分解产生蔗糖，提高蔗糖析出率，另外经α-半乳糖苷酶处理制得的蔗糖结晶颗粒均匀性、光泽度均有一定的改善(张树政，1984)。

α-半乳糖苷酶在饲料工业中的应用：