[发明专利]一种构建微生物共培养体系产细菌纤维素的方法

权利要求书

1.一种微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：采用木醋杆菌与衣藻两种微生物共培养的方法，构建共培养体系，步骤如下：

第一步：木醋杆菌与衣藻分别进行种子培养；

第二步：将衣藻种子液经离心浓缩后，获得衣藻细胞，衣藻种子液浓缩液加入浓度0.3-1.0 % (w/v)的海藻酸钠溶胶中，再注射至浓度为0.3-1.0 % (w/v)氯化钙溶液中进行固定化，经微流控技术固定于海藻酸钙中，最终制备成线状凝胶；

第三步：木醋杆菌接种至发酵培养基中后，加入第二步中制备的衣藻凝胶，进行发酵动态培养；

第四步：发酵结束，除去木醋杆菌细胞和衣藻，获得纯净的细菌纤维素。

2.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第一步木醋杆菌与衣藻用各自的种子液在不同培养条件下进行种子扩增培养。

3.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第一步木醋杆菌培养条件：温度25-32℃，摇床转速90-250 rpm，培养时间6-72 h。

4.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第一步衣藻培养条件：温度20-25℃，摇床转速80-270 rpm，光照培养箱中培养6-48 h。

5.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第二步用注射泵控制流速为200mL/h。

6.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第三步木醋杆菌接种量为2-20%。

7.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第四步除去固定化衣藻凝胶的方法：将获得的产物放入0.5-1.2 mol/L pH 7的磷酸缓冲溶液中震荡，过滤，弃滤液。

8.根据权利要求1所述的微生物共培养体系产细菌纤维素的方法，其特征在于：第四步除去木醋杆菌细胞的方法：用1-10 ‰ (w/v)的NaOH和1-10‰(v/v)的H₂O₂在70-100℃条件下处理0.5-3.0小时，去离子水洗涤至pH中性为止。