[发明专利]一种抗肿瘤小分子多肽及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和医药领域，特别涉及一种抗肿瘤小分子多肽及应用。

背景技术

FGFRs(成纤维细胞生长因子受体)在多种肿瘤组织中表达异常：FGFRs的突变和异常扩增在妇科肿瘤特别是乳腺癌的发生发展中起了重要的作用。如在乳腺癌中发现了FGFR1和FGFR2的过度扩增，在膀胱癌中发现FGFR3突变，在多发性骨髓瘤中发现FGFR3的易位，胰腺癌病人癌细胞中FGFR2表达量高的存活期明显短于表达量低的病人，在胃癌、肺癌、卵巢癌、子宫内膜癌中均有FGFR2的基因突变、过表达或者表达异常；另外，在FGFR2在基因表达的剪切过程中由原来Ⅲb亚型转变为Ⅲc亚型后，往往伴随着肿瘤恶性化增加的表现形式，包括乳腺癌、前列腺癌、胃癌、食管癌、子宫内膜癌等，而阻断FGFRs磷酸化介导的信号通路可抑制肿瘤的生长及肿瘤细胞的增殖等作用。

目前，已有蛋白类药物通过阻断FGFRs信号通路达到治疗肿瘤疾病的效果，如Cetuximab(西妥昔单抗)、panitumumab(帕尼单抗)等抗体。蛋白药物可较好的阻断FGFRs的信号传递，但是蛋白类药物由于分子量较大，注射到人体一般会有免疫原性。因此，多肽类药物具有分子量小，在人体内不结存，无副作用，免疫原性小，活性好等优点成为一个研究的热点。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种抗肿瘤小分子多肽。

本发明的另一目的在于提供所述的抗肿瘤小分子多肽的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种抗肿瘤小分子多肽，氨基酸序列如下所示：LQLQAEER；

所述的抗肿瘤小分子多肽在制备抗肿瘤药物中的应用；

所述的肿瘤优选为具有FGFRs表达生长依赖性的肿瘤细胞和/或肿瘤组织，特别是具有FGFR2表达生长依赖性的肿瘤细胞和/或肿瘤组织，比如目前有文献报道和本发明实施例证实FGFR2生长依赖的乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、食管癌和胃癌等。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：本发明提供的抗肿瘤小分子多肽能特异性结合FGFR2，阻断FGFRs信号通路，达到抗肿瘤的效果。

附图说明

图1是P5肽对MCF-7细胞作用的结果图。

图2是P5肽对各细胞株的抑制效果图，其中：图A为P5肽对DU145细胞株的抑制效果图，图B为P5肽对SGC7901细胞株的抑制效果图，图C为P5肽对KYSE510细胞株的抑制效果图，图D为P5肽对KYSE30细胞株的抑制效果图。

图3是FGF2上P5肽同源序列在FGFR2中结合位置的模拟结构图。

图4是P5及其衍生肽对DU145细胞的抑制作用结果图；其中，图A为P5DU145细胞的抑制作用结果图，图B为P5-1对DU145细胞的抑制作用结果图，图C为P5-2对DU145细胞的抑制作用结果图，图D为P5-3对DU145细胞的抑制作用结果图。

图5是P5及突变多肽P5-3与FGFR2结合能力检测结果图；其中，图Aa为用FGFR2抗体检测FGFR2蛋白的结果图，图Ab为用10μg/ml生物素标记的P5检测FGFR2蛋白的结果图，图Ac为用10μM生物素标记的检测FGFR2蛋白的结果图，泳道1为细胞裂解物，泳道2为FGFR2蛋白；图B为ELISA法检测P5肽及P5-3肽与FGFR2蛋白结合的结果图。

图6是检测加入P5后FGFR2相关信号因子变化的Western Blot图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

本发明首先采用生物信息学的方法，依照FGF2-FGFR2蛋白结合模式，以FGF2-FGFR2相互作用位点为基础，采用Accerly公司的蛋白模拟软件Discovery Studio2.5/3.5对FGF2及其特异性结合受体FGFR2IIIc的结合进行分析，设计小分子多肽，其中每条多肽中都含有FGF2上1至3个与FGFR2作用的关键氨基酸，并且要求多肽长度是刚好落在FGFR2蛋白的活性口袋中，希望这几条多肽(如表1所示)能阻断FGF2与FGFR2的结合，从而发挥抗肿瘤的功能。

其次，采用MTT法表达并依赖FGFR2生长的肿瘤细胞株进行筛选，从候选的若干条短肽中发现其中一条P5肽能显著抑制肿瘤细胞的生长，并通过克隆形成实验进一步证实了P5肽的抑瘤效果。