[发明专利]枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺。

背景技术

柔红霉素为第一代蒽环类抗肿瘤抗生素，主要用于各种类型的急性白血病，口服不吸收，只能静脉注射给药，常用其盐酸盐和枸橼酸盐的形式。

脂质体是由磷脂双层构成的具有水相内核的脂质微囊。由于其具有缓释、低毒及组织靶向性等特点，目前常应用于包载药物、基因转移等许多方面。

枸橼酸柔红霉素脂质体注射液是Gilead公司研制开发的产品，将枸橼酸柔红霉素包封于脂质体中再进行注射。柔红霉素包封于脂质体中后，不仅可以避免吞噬细胞的吞噬，还可以改变柔红霉素在组织中的分布，增加其对癌变细胞的定向性，能使柔红霉素选择性地杀伤癌细胞或抑制癌细胞的繁殖，而对正常细胞和组织无损害或抑制作用。因此，以脂质体为载体的柔红霉素疗效得到了提高，毒性降低，免疫反应减轻。

柔红霉素脂质体注射液所以能具有这些优点得益于柔红霉素能够很好的被包封于脂质体中，而包封率是包封程度的直观表现。目前市售枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的包封率为90％，从药物安全有效的角度考虑，包封率仍有较大的提升空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺，该工艺制备得到的枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的包封率在97％以上，且稳定性良好。

为了实现本发明所述目的，发明人提供了以下技术方案。

枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺，包括以下操作步骤：

A.配制枸橼酸溶液

配制浓度为8.64％、pH值为5.0的枸橼酸溶液，备用；

B.制备空白脂质体

在68-72℃条件下，将二硬脂酰磷脂酰胆碱37.65重量份、胆固醇9重量份、无水乙醇42体积份与步骤A所得枸橼酸溶液258体积份混合，搅拌1小时，得到类脂溶解液，备用；

在68-72℃条件下，将类脂溶解液置于纳米挤压机中挤压制备空白脂质体，先用孔径为0.2μm的膜，在挤压压力450-600Psi的条件下反复挤压至空白脂质体平均粒径为200-220nm，然后用孔径为0.1μm的膜，在挤压压力200-300Psi的条件下反复挤压至空白脂质体的平均粒径为120-130nm，再用孔径为0.05μm的膜，在挤压压力120-150Psi的条件下反复挤压至空白脂质体的平均粒径为55-62nm，最终所得空白脂质体置于4℃条件下保存，备用；

C.配制蔗糖溶液

配制浓度为8.5％、pH值为5.0的蔗糖溶液，备用；

D.空白脂质体透析

在4℃条件下，将步骤B制备得到的空白脂质体密封于透析袋中，置于步骤C所得蔗糖溶液中透析4小时，如此重复，共透析3次，每次更换蔗糖溶液；

透析完毕后，调节空白脂质体的pH值至8.0，备用；

E.配制盐酸柔红霉素溶液

称取盐酸柔红霉素2.4重量份，溶于90体积份步骤C所得蔗糖溶液，随后调节pH值至8.0，最后再加入步骤C所得蔗糖溶液定容至100体积份，得盐酸柔红霉素溶液，备用；

F.配制蔗糖溶液

配制浓度为8.5％、pH值为8.0的蔗糖溶液，备用；

G.制备枸橼酸柔红霉素脂质体溶液

在68-72℃条件下，将步骤D所得透析后的空白脂质体、步骤E得到的盐酸柔红霉素溶液和200体积份步骤F所得蔗糖溶液混合，搅拌至pH值为5.6-6.0时，停止搅拌，得枸橼酸柔红霉素脂质体溶液，冷却至室温，备用；

H.配制甘氨酸蔗糖氯化钙缓冲液

每100ml中含有7.6g蔗糖、0.376g甘氨酸、0.028二水氯化钙，pH值为5.8；

I.制备枸橼酸柔红霉素脂质体注射液

向步骤G所得枸橼酸柔红霉素脂质体溶液中加入甘氨酸蔗糖氯化钙缓冲液稀释至柔红霉素的浓度为2mg/ml，所得枸橼酸柔红霉素脂质体稀释溶液经0.2μm膜进行无菌过滤，即得到枸橼酸柔红霉素脂质体注射液。

上述枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺，步骤A所述配制枸橼酸溶液，使用1mol/L的NaOH溶液调节pH值为5.0。

上述枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺，步骤C所述配制蔗糖溶液，使用1mol/L的HCl溶液调节pH值为5.0。

上述枸橼酸柔红霉素脂质体注射液的制备工艺，步骤D所述空白脂质体透析，使用1mol/L的NaOH溶液调节空白脂质体的pH值至8.0。