[发明专利]一种检测大鼠支气管败血波氏杆菌的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种检测大鼠支气管败血波氏杆菌的试剂盒，其特征在于，包括10×Taqman PCR缓冲液、50μmol·L^-1的上游引物BVF的水溶液、50umol·L^-1的下游引物BVR的水溶液、dNTP mixture、25mmol·L^-1的MgCl₂水溶液、5U·L^-1的Taq DNA聚合酶水溶液、标准阳性模板、20×SYRB Green荧光染料和无菌双蒸水；所述上游引物BVF的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物BVR的序列如SEQ ID NO.2所示；所述标准阳性模板为支气管败血波氏杆菌DNA。

2.一种应用权利要求1所述的试剂盒检测大鼠支气管败血波氏杆菌的方法，其特征在于，使用所述试剂盒对大鼠支气管败血波氏杆菌进行荧光定量PCR检测。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR检测的反应体系为：2μL的10×Taqman PCR缓冲液；1μL浓度为50μmol·L^-1的上游引物BVF的水溶液；1μL浓度为50umol·L^-1的下游引物BVR的水溶液；0.6μL的dNTP mixture；1.6μL溶度为25mmol·L^-1的MgCl₂水溶液；0.20 μL浓度为5U·L^-1的Taq DNA聚合酶水溶液；1μL标准阳性模板或待测样品；0.4μL的20×SYRB Green荧光染料；其余为无菌双蒸水，体系的总体积为20μL；所述PCR反应程序如下：95℃变性5min，94℃预变性30s，60℃退火30s，72℃度延伸45s，循环35次，最后72℃度延伸5min。