[发明专利]一种嵌合Fc受体的融合蛋白及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种嵌合Fc受体的融合蛋白及其制备方法和应用，所述融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4。该融合蛋白可以与IgG的Fc结合，尤其是在与IgG的免疫复合物结合后，能够有效激活嵌合Fc受体细胞内部的信号传导功能，刺激细胞活化、增殖和分化，最终激活其免疫杀伤功能。

技术领域

本发明涉及一种新型重组融合蛋白及其制备方法和应用，特别涉及一种嵌合了Fc受体的重组融合蛋白及其制备方法和应用。

背景技术

肿瘤尤其是恶性肿瘤是当今世界严重危害人类健康的疾病，在各种疾病所致死亡中高居第二位。而且近年来，其发病率呈明显上升趋势。恶性肿瘤治疗效果差，晚期转移率高，预后多不佳。目前临床上所采用的常规治疗方法如放、化疗和手术治疗虽然在很大程度上缓解了病痛，延长了生存时间，但这些方法均存在很大的局限性，其疗效难以进一步提高。

大量研究表明，肿瘤在形成过程中，可通过多重机制，逃避免疫系统的监视，我们将这一过程称之为肿瘤组织的免疫逃逸或免疫编辑。T细胞在肿瘤免疫的过程中处于核心地位，如果能调动体内的杀伤武器，将是非常有效且安全的治疗策略。T细胞的活化启动和效应发挥的过程中至少需要两种信号存在，第一种信号是抗原特异性的，由主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex，MHC)以及与其结合的抗原肽被T细胞受体(T cell receptor，TCR)识别并结合后，由TCR复合物向T细胞内传导激活信号；第二种激活信号是抗原非特异性的，是由抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)和T细胞上多种辅助分子之间的配对和相互作用而提供的，能够提供第二种激活信号的一类T细胞膜蛋白又被称为共刺激分子，在T细胞活化中发挥重要作用。

随着肿瘤免疫学理论和技术的发展，免疫治疗在肿瘤治疗中的作用日益受到重视。T淋巴细胞在肿瘤免疫应答中起主要作用，包括CIK(cytokine-induced killer)细胞治疗在内的T细胞过继性细胞免疫治疗虽然在部分肿瘤中取得了一定的效果，但在大多数肿瘤中疗效尚不能令人满意。近年来发展的利用基因改造技术表达肿瘤特异性嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)的T细胞显示出持久的靶向杀伤活性，为过继性细胞免疫治疗注入了新的解决方案。CAR是将识别肿瘤相关抗原的ScFv(single-chain variablefragment，ScFv)单链抗体、跨膜区和能诱导T细胞活化的信号转导结构域在体外进行基因重组，形成重组质粒，在体外通过慢病毒转染技术转染经纯化和大规模扩增后的T细胞，稳定表达CAR的T细胞称之为CAR-T细胞。这种基因改造也可帮助T细胞直接识别肿瘤而不必要求通过TCR来识别MHC-抗原肽的限制性。临床前和临床研究均显示(Cancer Res 2010；70:9053-9061；Sci Transl Med 3，95ra73)，CAR-T在体外及体内均有对特定肿瘤抗原的高度亲和性及对抗原负荷细胞的高效杀伤性。

CAR-T细胞较其他基于T细胞的治疗方式存在以下优势：①使用患者自体细胞，降低排异反应风险；②鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的CAR基因构建一旦完成，便可以被广泛利用；③CAR既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围；④CAR-T细胞作用过程不受MHC的限制；⑤CAR-T细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存活。