[发明专利]一种鼓槌石斛种子组织培养快速繁殖方法有效

专利信息
申请号: 201410674752.6 申请日: 2014-11-21
公开(公告)号: CN104322375B 公开(公告)日: 2017-07-28
发明(设计)人: 霍丽妮;苏钛;陈睿;李培源;苏炜;吕金燕 申请(专利权)人: 广西中医药大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 代理人: 靳浩
地址: 530213 广西壮*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 一种 鼓槌 石斛 种子 组织培养 快速 繁殖 方法
【权利要求书】:

1.一种鼓槌石斛种子组织培养快速繁殖方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

步骤一、将预处理的鼓槌石斛种子播种于诱导培养基中,在温度为28-30℃,光照强度为2300-2500lux,光照时间为13-15h/d的条件下培养7-15天,得到鼓槌石斛小芽,其中所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,然后加入0.5-3mg/L萘乙酸、1.0-3.0mg/L吲哚乙酸、0.2-2.0mg/L噻苯隆、25-35g/L蔗糖及3-5g/L琼脂,并调整诱导培养基pH值为5.5-6;

步骤二、将鼓槌石斛小芽置于继代培养基中,培养30-60天,其中培养温度为30-32℃,在光照强度为2300-2600lux照射13-15h/d,培养30-60天,获得鼓槌石斛组培分化苗,所述继代培养基为:以MS为基本培养基,加入0.5-2mg/L玉米素、1-3mg/L 6-苄氨基嘌呤、0.5-2mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L吲哚丁酸、0.2-1.0mg/L噻苯隆、25-35g/L蔗糖及4-5g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为5.7-6;

步骤三、将鼓槌石斛组培分化苗移栽至生根培养基中,培养30-50天,培养温度28-32℃、光照强度2500-3000lux,光照时间为13-15h/d,然后移到自然光下培养45-60天,得到鼓槌石斛生根组培苗,所述生根培养基为:1/2MS为基本培养基,加入5-20%香蕉、0.1-2.0g/L吲哚丙酸、0.2-3.0mg/L萘乙酸、2-5%蔗糖及0.2-0.5%活性炭,并调整生根培养基的pH值为5.6-6;

步骤四、将鼓槌石斛生根组培苗移栽至苗床上,培养30-40天,鼓槌石斛生根组培苗生长稳定后即可移栽至大棚中。

2.如权利要求1所述的鼓槌石斛种子组织培养快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤一中鼓槌石斛种子的预处理是将鼓槌石斛种子置于75-80%的乙醇溶液中浸泡25-40秒,然后取质量分数为0.1%升汞溶液消毒10-30分钟,并置于无菌水下反复清洗。

3.如权利要求1所述的鼓槌石斛种子组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤四所述苗床含有基质,所述基质由以下重量份的组分组成:20-30树皮、10-20杂木、20-30蛭石及10-15珍珠岩。

4.如权利要求1所述的鼓槌石斛种子组织培养快速繁殖方法,其特征在于,步骤四中将鼓槌石斛生根组培苗移栽至苗床前,先将鼓槌石斛生根苗根部的培养基冲洗干净,晾干水汽后再移栽至苗床上。

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