[发明专利]华支睾吸虫实时荧光PCR检测试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201410676271.9 | 申请日： | 2014-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN104561264A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 黄达娜;张仁利;吴春利;阳帆;李玥;武伟华;李晓恒;高世同;耿艺介 | 申请（专利权）人： | 深圳市疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 华支睾 吸虫 实时 荧光 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种华支睾吸虫的实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，包括PCR特异性引物和荧光探针；其中，
所述PCR特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的华支睾吸虫核糖体18S上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的华支睾吸虫核糖体18S下游引物；
所述荧光探针具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列，且所述荧光探针5’端标记荧光报告基团、3’端标记荧光淬灭基团。
2.如权利要求1所述的华支睾吸虫的实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述荧光报告基团为FAM。
3.如权利要求1或2所述的华支睾吸虫的实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有阳性对照；所述阳性对照为带有华支睾吸虫18SrRNA基因的重组质粒。
4.如权利要求1或2所述的华支睾吸虫的实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有阴性对照；所述阴性对照为RNase free dH2O。
5.一种华支睾吸虫的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
提取待测样本DNA；
以提取的待测样本DNA为模板进行实时荧光PCR；其中，所述实时荧光PCR过程中采用的引物为具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的华支睾吸虫核糖体18S上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的华支睾吸虫核糖体18S下游引物；所述实时荧光PCR过程中采用的荧光探针为具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列的荧光探针，且所述荧光探针5’端标记荧光报告基团、3’端标记荧光淬灭基团；
检测PCR过程中的荧光信号。
6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述荧光报告基团为FAM。
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