[发明专利]半日花烷型二萜Leoleorin H在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种半日花烷型二萜Leoleorin H在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

半日花烷型二萜为二环二萜，以十氢萘为母核，包括其去甲、次裂和重排化合物，是结构类型较丰富的一类二萜。最具有代表性的半日花烷型二萜是从穿心莲（Andrographis panis）中分离得到的穿心莲内酯（Andrographolide）和从毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）中得到的鞘蕊花素（Forskolin）。前者具有较好的抗菌、消炎功效，后者可用于强心、抗抑郁、解痉和治疗哮喘。近年来，又发现了大量新的半日花烷型二萜，结构变化丰富，其中不少具有良好的抗菌、消炎和抗肿瘤等生物活性。

益母草为唇形科益母草属植物Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分，始载于《神农本草经》，味辛、微苦，性微寒，入心包、肝经，具有活血调瘀、利尿消肿之功效。临床上用于月经不调、产后瘀痛、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。

Leoleorin H最早由Wu HK等采用常规的柱色谱方法从益母草（Leonotis leonurus）中分离得到的半日花烷型二萜类化合物[Labdane Diterpenoids from Leonotis leonurus, Phytochemistry 91 (2013) 229–235]。Leoleorin H为白色粉末，分子式为C₂₂H₃₄O₅,分子量376.54。其化学结构式如下：

Leoleorin H的生物活性研究资料很少。Wu HK等研究了其对CNS受体的结合能力，发现Leoleorin H能显著抑制放射性配体和5-羟色胺5-HT_1A受体的结合[Labdane Diterpenoids from Leonotis leonurus, Phytochemistry 91 (2013) 229–235]。该化合物的其他有关活性研究未见报道。

发明内容

本发明公开了Leoleorin H的抗宫颈癌、白血病和乳腺癌的作用，目的在于提供Leoleorin H用于制备抗宫颈癌、乳腺癌和白血病的药物。

为了实现上述目的，本发明采用标准的MTT法对多种肿瘤细胞进行体外筛选，包括：人宫颈癌HeLa、人乳腺癌MCF-7、人急性早幼粒白血病细胞HL-60、人肺癌A549、人结肠癌HCT15。研究发现，Leoleorin H对人宫颈癌HeLa细胞、急性早幼粒白血病HL-60细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的抗增殖活性强并呈良好的时效与量效关系，对A549和HCT15活性弱； 同时将其作用正常肝细胞L-O2，未发现毒性反应。结果表明，Leoleorin H具有抗宫颈癌、白血病和乳腺癌的作用，可以用于制备抗宫颈癌、乳腺癌和白血病的药物。

化合物Leoleorin H的制备方法参考：Labdane Diterpenoids from Leonotis leonurus, Phytochemistry 91 (2013) 229–235。

附图说明

图1为不同浓度Leoleorin H作用不同细胞株24小时后的抑制生长效果

图2为不同浓度Leoleorin H作用不同细胞株72小时后的抑制生长效果。

具体实施方式

实施例1：化合物Leoleorin H的制备方法

益母草地上部分干燥粉末（购自上海康桥中药饮片有限公司，产地安徽） 5kg，室温条件下采用渗漉法用石油醚提取3次脱脂，每次体积15L；药渣再用丙酮提取3次，每次体积15L，合并丙酮提取液，减压回收，得浸膏280g。浸膏用300ml二氯甲烷和甲醇的混合溶剂（1:1, V/V）溶解，与硅胶混合拌样（500g，200-300目），挥干溶剂后得拌样均匀的硅胶。采用200-300目硅胶（1500g）装柱，对拌样硅胶进行分离。用正己烷-乙酸乙酯梯度洗脱（10:1, 4:1, 2:1, 1:1, 1:4, 0:1, V/V）。收集正己烷-乙酸乙酯（1:1）洗脱部分，减压回收溶剂后，进一步用正己烷-乙酸乙酯进行梯度洗脱（3:1, 2:1, 1:1，V/V），根据薄层点板即可得化合物Leoleorin H（75mg）。